脑源性微粒的提

发布时间：2021-10-11 14:10

　　目的:微粒（microparticle）是一种细胞激活或凋亡时所分泌的直径在0.1-1um之间的细胞囊泡。近年来,研究发现微粒可以介导某些疾病的发生,也可以作为感染、外伤的生物学标记物,并且还具有潜在的治疗价值,更为有意义的是,已有报道证实微粒作为物质运输载体,发挥着细胞间m RNAs、micro RNAs、脂类与蛋白质的传递作用。由此得到了基础与临床医学研究越来越多的关注。本实验通过对BDMP的两种提取方法进行比较,探索流式细胞仪对微粒浓度的检测,并且探索冻存条件对BDMP的影响以及收集临床TBI患者血浆标本对其脑源性微粒（BDMP）含量进行检测,试图:（1）比较BDMP不同提取方法的特点,为BDMP分离、纯化工作奠定基础;（2）建立起一套关于微粒含量行之有效的检测鉴定方法,为以后大规模开展BDMP的研究提供保障;（3）明确不同温度环境下BDMP的变化规律,为BDMP的保存提供参考;（4）在目前已有研究证实鼠源性BDMP存在的基础上,证实颅脑创伤（TBI）后患者血中也有BDMP的存在,为TBI后临床患者凝血功能紊乱的发生机制提供新思路。方法:（1）通过应用流式细胞技术/RNA定量提取... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：117 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

消化法与研磨法提取的BDMP的流式细胞技术检测结果A.消化法与研磨法提取的BDMP总数比较

图 2 消化法与研磨法提取的 BDMP 内 RNA 含量检测结果1.3 讨论1.3.1 微粒的释放微粒能够从不同的体液中分离,包括胸腔积液[93],血浆[94, 95],房水[腹水[98, 99],羊水[100, 101],精液[102-104],唾液[95, 101]),鼻腔分泌物[105],脑脊液气管肺泡灌洗液[107, 108],滑液[109, 110]),胆汁[111],尿液[112, 113]和痰[114]。微粒形成的不同环境对微粒的来源、结构与功能都有影响。事微粒之间的差异很大,这导致了不同的研究背景下微粒的不同名称[11通用术语经常被用来描述细胞衍生的囊泡,包括“微粒”。然而,现在囊泡表示细胞分泌的各种囊泡的总称，包括外泌体 exosomes[116]，微microvesicles[117],核外颗粒体（ectosomes）[118],膜颗粒 membrane par泌体样囊泡（exosome-like vesicles）[120]和凋亡小体[121]apoptotic ves（microparticles）[122]。

式细胞技术检测 BDMP 方法的设定。A.使用 Megamix 标准微粒确定 BDMP 的范围。B. 为 BDMP 区域，圈选 P2 区域为荧光标准品区域。C.圈选 P1 区域进入，记录 APC-AnnexinD. APC-AnnexinⅤ阴性对照。 方法的重现性分别取 3 份荧光标准品，用流式细胞仪检测 P2 区域颗粒的个数，连续计算 3 组数据的平均 RSD/%为 5.8%，结果见表 4。表 4 流式细胞术检测荧光标准品（P2 区域颗粒个数）的日内差样本编号测定次数平均值 RSD/%1 2 3 4 51 200 198 232 230 235 219 8.42 159 182 171 182 167 172.2 5.43 260 236 242 248 242 245.6 3.7


本文编号：3430665