AQP-4和ERK1/2通路在瑞芬太尼后处理对成人心肌缺氧/复氧损伤保护中的作用
发布时间：2021-10-11 10:49
目的:通过构建成人心肌缺氧/复氧损伤模型,探讨瑞芬太尼后处理对成人心肌缺氧/复氧损伤的保护效应,进一步观察三种阿片受体（μ、δ、κ）在此效应中的作用,以及此效应是否通过细胞外调节蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2）信号通路转导,调控水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）表达,减轻心肌水肿程度而实现。方法:通过剪取完整成人右心耳肌小梁,建立心肌缺氧/复氧损伤模型,将66条肌小梁随机分为11组,正常对照组（C组）:肌小梁以复氧液灌注210 min,未行缺氧/复氧;缺氧/复氧组（HR组）:肌小梁缺氧90 min/复氧120 min;10-11、10-10或10-99 M瑞芬太尼后处理组（LRP、MRP或HRP组）:肌小梁缺氧90 min/复氧120 min,在缺氧结束前10 min开始分别灌注10-11、10-10或10-99 M瑞芬太尼至复氧开始后10 min停止;μ、δ或κ受体拮抗...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
右心耳肌小梁结构网
10材料与方法1材料1.1实验标本经福建医科大学附属协和医院临床研究伦理审查委员会审批及患者知情同意，取成年心脏瓣膜置换患者的右心耳组织（约10×6mm），置于含预冷氧合改良台式液的密闭瓶中，10分钟内转运至实验室。在显微外科显微镜下，将整块右心耳组织解剖出合适独立的肌小梁(长度≥3mm,直径≤1mm)用于实验，每个右心耳组织可取2~3条符合要求的肌小梁。解剖操作时间控制在10分钟内。组织入选标准：成人患者体外循环下瓣膜置换手术的右心耳标本。组织排除标准：患者出现病理生理改变包括房性心律失常和（或）服用抗心律失常药物、右心室心力衰竭、糖尿病和（或）服用降血糖药物。图1右心耳肌小梁结构网图2心脏手术中剪取的右心耳组织1.2主要试剂试剂厂家品牌
162方法2.1建立心肌缺氧/复氧损伤模型依据Walker等[17]人的操作技术方法,将符合实验要求的肌小梁两端心房壁楔形区域均用7/0缝合丝线结扎，其中一端接张力换能器，另一端接水浴槽底部固定杆，连接好的肌小梁垂直悬吊在37℃恒温水浴槽中，调零后，无牵拉置放30min。肌小梁一旦悬挂，通过二块铂电极板，给予肌条连续方波电刺激(刺激频率1Hz,刺激持续时间5ms,刺激强度为120%阈刺激)。稳定期：随后施加张力前负荷，从0g负荷开始，每5min增加0.05g的前负荷，肌条也随之被拉长至一定距离，至获得最大发展张力时停止牵拉，稳定30~60min,此时为稳定的最适前负荷。然后开始缺氧/复氧处理。缺氧期：处理时间90min,缺氧灌注液持续孵育肌小梁，以缺氧气体（95%N2+5%CO2）持续饱和，电刺激频率改为4Hz,其他参数不变。复氧期：处理时间120min,复氧灌注液持续孵育肌小梁，以复氧气体（95%O2+5%CO2）持续饱和，电刺激参数与稳定期相同。实验结束后，测量肌小梁的长度（Length）及重量(Mass)，并计算肌小梁的横截面积（cross-sectionalarea,CSA），如CSA＞1mm2则排除研究。CSA计算公式：其中Mass、Length分别为肌小梁质量、长度；ρ为肌小梁密度，评估为1mg/mm3。图3肌小梁缺氧/复氧损伤模型简图
【参考文献】：
期刊论文
[1]Post-conditioning with gradually increased reperfusion provides better cardioprotection in rats[J]. Guo-ming Zhang,Yu Wang,Tian-de Li,Xiao-yan Li,Shao-ping Su,Yuan-yuan Sun,Xiu-hua Liu. World Journal of Emergency Medicine. 2014(02)
[2]脊髓内MAPK-ERK通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用[J]. 蒋萌,王霖,蒋海河. 中国当代儿科杂志. 2013(05)
本文编号：3430359
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
右心耳肌小梁结构网
10材料与方法1材料1.1实验标本经福建医科大学附属协和医院临床研究伦理审查委员会审批及患者知情同意，取成年心脏瓣膜置换患者的右心耳组织（约10×6mm），置于含预冷氧合改良台式液的密闭瓶中，10分钟内转运至实验室。在显微外科显微镜下，将整块右心耳组织解剖出合适独立的肌小梁(长度≥3mm,直径≤1mm)用于实验，每个右心耳组织可取2~3条符合要求的肌小梁。解剖操作时间控制在10分钟内。组织入选标准：成人患者体外循环下瓣膜置换手术的右心耳标本。组织排除标准：患者出现病理生理改变包括房性心律失常和（或）服用抗心律失常药物、右心室心力衰竭、糖尿病和（或）服用降血糖药物。图1右心耳肌小梁结构网图2心脏手术中剪取的右心耳组织1.2主要试剂试剂厂家品牌
162方法2.1建立心肌缺氧/复氧损伤模型依据Walker等[17]人的操作技术方法,将符合实验要求的肌小梁两端心房壁楔形区域均用7/0缝合丝线结扎，其中一端接张力换能器，另一端接水浴槽底部固定杆，连接好的肌小梁垂直悬吊在37℃恒温水浴槽中，调零后，无牵拉置放30min。肌小梁一旦悬挂，通过二块铂电极板，给予肌条连续方波电刺激(刺激频率1Hz,刺激持续时间5ms,刺激强度为120%阈刺激)。稳定期：随后施加张力前负荷，从0g负荷开始，每5min增加0.05g的前负荷，肌条也随之被拉长至一定距离，至获得最大发展张力时停止牵拉，稳定30~60min,此时为稳定的最适前负荷。然后开始缺氧/复氧处理。缺氧期：处理时间90min,缺氧灌注液持续孵育肌小梁，以缺氧气体（95%N2+5%CO2）持续饱和，电刺激频率改为4Hz,其他参数不变。复氧期：处理时间120min,复氧灌注液持续孵育肌小梁，以复氧气体（95%O2+5%CO2）持续饱和，电刺激参数与稳定期相同。实验结束后，测量肌小梁的长度（Length）及重量(Mass)，并计算肌小梁的横截面积（cross-sectionalarea,CSA），如CSA＞1mm2则排除研究。CSA计算公式：其中Mass、Length分别为肌小梁质量、长度；ρ为肌小梁密度，评估为1mg/mm3。图3肌小梁缺氧/复氧损伤模型简图
【参考文献】：
期刊论文
[1]Post-conditioning with gradually increased reperfusion provides better cardioprotection in rats[J]. Guo-ming Zhang,Yu Wang,Tian-de Li,Xiao-yan Li,Shao-ping Su,Yuan-yuan Sun,Xiu-hua Liu. World Journal of Emergency Medicine. 2014(02)
[2]脊髓内MAPK-ERK通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用[J]. 蒋萌,王霖,蒋海河. 中国当代儿科杂志. 2013(05)
本文编号：3430359
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