冷诱导RNA结合蛋白促进冷冻保存大鼠坐骨神经异体移植后神经再生的研究

发布时间：2021-10-13 01:31

　　目的探讨冷诱导RNA结合蛋白（cold-inducible RNA binding protein,CIRP）对冷冻保存大鼠坐骨神经活性及同种异体移植后神经再生的影响。方法176条15 mm雄性SD大鼠坐骨神经片段置于DMEM溶液中,分别在4℃、15℃、32℃预处理24 h（A组:4℃组,B组:15℃组,C组:32℃组）,设置新鲜神经对照组（D组）,Real-time PCR和Western blot检测CIRP基因及蛋白表达。将上述四组神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-AM/propidium iodide,Calcein-AM/PI）荧光染色、激光共聚焦显微镜观察保存后神经活细胞、死细胞情况,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。取冷冻保存4周的坐骨神经,于37℃、5%CO₂孵箱中培养7天,Western blot检测NGF、GDNF蛋白表达。用冷冻保存4周或新鲜雄性SD大鼠坐骨神经（E组:新鲜神经组）,修复对应的雄性Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损（A′:同种异体移植4℃组、B′:同种异体移植15℃... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

大鼠坐骨神经预处理后CIRPmRNA水平（A）及Westernblot分析CIRP蛋白水平（B）（±s，n=6；*P<0.05）

D 组 E 组图 2 大鼠坐骨神经冷冻保存 4 周后 Calcein-AM /PI 荧光染色激死细胞数量（×400，标尺=50 μmFig. 2 Confocal microscope analysis of the live/dead cell stainedsciatic nerve after cryopreserved 4 we

图 3 大鼠坐骨神经冷冻保存 4 周后 Bax（A, B）,Bcl-2（A, C）蛋白表达及 Bax/Bcl-2 比率（D）（ ±s，n=6；* P<0.05 ）。Fig. 3 The protein level of Bax（A, B）,Bcl-2（A, C） and the index of Bax/Bcl-2 in rat sciaticnerve after cryopreserved 4 weeks. Data are means±SEM (n＝6 each group, *P<0.05).


本文编号：3433699