miR-494对大鼠深低温停循环后脑保护机制的研究
发布时间：2021-10-15 14:04
目的:深低温停循环（deep hypothermic circulatory arrest,DHCA）具有为术者提供清晰的术野、降低患者机体代谢率、延长脑部等重要组织器官缺血缺氧耐受时间等诸多特点,是心脏外科手术中不可或缺的重要辅助技术。但DHCA神经系统并发症仍然是深低温停循环术后最严重的并发症之一,影响患者的预后甚至危及生命。miR-494与脑缺血、神经退行性病变、脑肿瘤、脊髓病变等疾病密切相关,通过调节多种下游靶点的表达,对细胞的增殖、分化、迁移以及凋亡发挥重要的调控作用。本研究通过构建大鼠深低温停循环模型,探讨miR-494在DHCA后海马组织中的变化及在抵抗DHCA后脑损伤中可能的保护作用。方法:80只SD大鼠随机分为5组,每组16只。假手术组（Sham）:术前5天侧脑室注射10μl PBS液,5天后行体外循环2小时不降温停循环;深低温停循环组（DHCA）:术前5天侧脑室注射10μl PBS液,5天后行DHCA手术;上调miR-494后深低温停循环组（AgomiR-494）:术前5天侧脑室注射10μl AgomiR-494慢病毒载体,5天后行DHCA手术;下调miR-494后...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
侧脑室注射示意图
图 2 体外循环插管及管路图A：左侧股动脉插管，B：右侧颈外静脉及气管插管，C：体外循环管道整体示意图动静脉端置管小心与体外循环管道连接，排气并检查管道及各接口处误后，膜肺进气端连接氧气，开始转机，温度探头润滑后置入肛门监测体免插入过深造成肠道破裂出血。起始流量 160ml/kg/min，使用冰袋物理降温水箱等方式逐渐降温，降温时间应至少大于 30 分钟，随着温度的降低小流量，随心率的降低逐渐减少呼吸机辅助次数，当温度达到 18℃时停，保持体外循环管道血液自循环，防止膜肺产生血栓。此时监护仪提示0mmHg，心率<50 次/分，心率血压虽然未完全达到零，但难以提供充分供给。维持体温 18℃停循环 60 分钟后，开始转流、复温，给予适当的 5氢钠注射液纠正酸中毒及呋塞米利尿，使用 100W 灯泡及变温水箱缓慢复温时间应至少大于 30 分钟，复温时逐渐增加流量，并随心率的增加而调机辅助次数。当体温达到 34℃时，应维持心率在 300 次/分以上，平均动
中国医科大学硕士学位论文3 结果3.1 侧脑室注射后大鼠脑组织荧光由于本实验使用的慢病毒载体中嵌有 GFP 绿色荧光蛋白，故成功转染后，在荧光显微镜下可以看到组织中发出绿色荧光。大鼠经侧脑室注射慢病毒载体，5 天后再次吸入异氟烷麻醉，断头法处死，于冰上分离出海马组织，立即制作成冰冻切片，于荧光显微镜下观察，可见海马组织呈现出绿色荧光，说明慢病毒载体成功将目的基因转染至大鼠海马组织，通过侧脑室注射的方法可以将携带AgomiR-494 及 AntagomiR-494 的慢病毒载体转染至大鼠海马组织。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Up-Regulation of Trem2 Inhibits Hippocampal Neuronal Apoptosis and Alleviates Oxidative Stress in Epilepsy via the PI3K/Akt Pathway in Mice[J]. Ai-Hua Liu,Min Chu,Yu-Ping Wang. Neuroscience Bulletin. 2019(03)
[2]深低温停循环大脑海马区差异性miRNAs表达变化及机制探讨[J]. 王小华,吉冰洋,孙燕华,朱贤,陈燕,王世磊,刘晋萍,龙村. 中国体外循环杂志. 2012(02)
[3]Expression profiles of microRNAs after focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats[J]. Fengguo Zhai 1,Xiuping Zhang 1,Yue Guan 2,Xudong Yang 1,Yang Li 3,Gaochen Song 4,Lixin Guan 1 1Department of Pharmacology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 2Department of Endocrinology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 3Department of Thoracic Surgery,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 4Department of Biochemistry,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China. Neural Regeneration Research. 2012(12)
[4]顺行性脑灌注与逆行性脑灌注[J]. 王茜,龙村. 中国体外循环杂志. 2011(01)
本文编号：3438103
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
侧脑室注射示意图
图 2 体外循环插管及管路图A：左侧股动脉插管，B：右侧颈外静脉及气管插管，C：体外循环管道整体示意图动静脉端置管小心与体外循环管道连接，排气并检查管道及各接口处误后，膜肺进气端连接氧气，开始转机，温度探头润滑后置入肛门监测体免插入过深造成肠道破裂出血。起始流量 160ml/kg/min，使用冰袋物理降温水箱等方式逐渐降温，降温时间应至少大于 30 分钟，随着温度的降低小流量，随心率的降低逐渐减少呼吸机辅助次数，当温度达到 18℃时停，保持体外循环管道血液自循环，防止膜肺产生血栓。此时监护仪提示0mmHg，心率<50 次/分，心率血压虽然未完全达到零，但难以提供充分供给。维持体温 18℃停循环 60 分钟后，开始转流、复温，给予适当的 5氢钠注射液纠正酸中毒及呋塞米利尿，使用 100W 灯泡及变温水箱缓慢复温时间应至少大于 30 分钟，复温时逐渐增加流量，并随心率的增加而调机辅助次数。当体温达到 34℃时，应维持心率在 300 次/分以上，平均动
中国医科大学硕士学位论文3 结果3.1 侧脑室注射后大鼠脑组织荧光由于本实验使用的慢病毒载体中嵌有 GFP 绿色荧光蛋白，故成功转染后，在荧光显微镜下可以看到组织中发出绿色荧光。大鼠经侧脑室注射慢病毒载体，5 天后再次吸入异氟烷麻醉，断头法处死，于冰上分离出海马组织，立即制作成冰冻切片，于荧光显微镜下观察，可见海马组织呈现出绿色荧光，说明慢病毒载体成功将目的基因转染至大鼠海马组织，通过侧脑室注射的方法可以将携带AgomiR-494 及 AntagomiR-494 的慢病毒载体转染至大鼠海马组织。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Up-Regulation of Trem2 Inhibits Hippocampal Neuronal Apoptosis and Alleviates Oxidative Stress in Epilepsy via the PI3K/Akt Pathway in Mice[J]. Ai-Hua Liu,Min Chu,Yu-Ping Wang. Neuroscience Bulletin. 2019(03)
[2]深低温停循环大脑海马区差异性miRNAs表达变化及机制探讨[J]. 王小华,吉冰洋,孙燕华,朱贤,陈燕,王世磊,刘晋萍,龙村. 中国体外循环杂志. 2012(02)
[3]Expression profiles of microRNAs after focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats[J]. Fengguo Zhai 1,Xiuping Zhang 1,Yue Guan 2,Xudong Yang 1,Yang Li 3,Gaochen Song 4,Lixin Guan 1 1Department of Pharmacology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 2Department of Endocrinology,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 3Department of Thoracic Surgery,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China 4Department of Biochemistry,Mudanjiang Medical University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang Province,China. Neural Regeneration Research. 2012(12)
[4]顺行性脑灌注与逆行性脑灌注[J]. 王茜,龙村. 中国体外循环杂志. 2011(01)
本文编号：3438103
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