褪黑素通过上调STIM1引起胞质钙增高并通过ERK途径诱导成骨细胞线粒体途径凋亡

发布时间：2021-11-01 14:42

　　目的:特发性脊柱侧凸为生长发育期间原因不明的脊柱侧凸,好发于青少年。脊柱侧凸不但可以造成患者脊柱的塌陷、疼痛、以及畸形,严重影响患者的生活质量以及劳动能力,并且对青少年的心理造成严重的创伤。特发性脊柱侧凸的治疗目前主要以手术治疗为主,并伴有术后并发症和明显创伤,因此,需要开发新的治疗方法。研究发现,特发性脊柱侧凸的发生与褪黑激素缺乏有关。应用褪黑素拮抗剂可以提高治疗双足大鼠脊柱侧凸模型的成功率,表明褪黑素缺乏可能增加脊柱侧凸的可能性和严重程度。对青少年特发性脊柱侧凸的前瞻性研究发现,褪黑激素补充剂可以预防脊柱侧凸的进展,特别是在曲线小于35度的轻度病例中。有趣的是,腹腔注射生理浓度的褪黑素并不能阻止特发性脊柱侧凸的发生和发展。然而,腹腔注射褪黑素的浓度远远高于生理浓度,可以预防特发性脊柱侧凸的发生和发展。因此,我们推测高浓度褪黑素可能在特发性脊柱侧凸中起治疗作用。此外,我们团队先前的研究发现,高浓度（1mM或以上）褪黑素抑制成骨细胞的增殖。因此,我们推测褪黑素可以通过抑制成骨细胞的异常增殖和恢复正常的骨生长来阻止畸形的发展。本研究旨在探索褪黑素抑制成骨细胞的增殖的机制。研究方法:1、应... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

褪黑素通过上调STIM1并通过ERK通路诱导成骨细胞凋亡A：用4mM的褪黑素作用成骨细胞48小时，并用SiRNA敲除STIM1，用westernbioting检

中国医科大学博士学位论文433.6SOCE介导的成骨细胞的凋亡通过ERK途径我们用4mM的褪黑素作用成骨细胞48小时，并加入钙通道阻滞剂TRPC，用westernbioting检测ERK蛋白的表达。结果表明，褪黑素显著降低ERK的磷酸化蛋白水平，当加入钙通道阻滞剂TRPC后，ERK磷酸化水平被显著激活。图8.6SOCE通过ERK途径介导的成骨细胞的凋亡A：用4mM的褪黑素作用成骨细胞48小时，并同时加入钙通路阻滞剂TRPC，用westernbioting检测ERK蛋白的表达。其中数值均表示为三次独立实验的平均值±SD。*P<0.05，**P<0.01。

为了研究褪黑素对成骨细胞增殖、分化、凋亡的影响,我们用不同浓度的褪黑素(0m M,1mM,2mM,4mM)作用成骨细胞48小时,并用CCK-8试剂检测褪黑素对成骨细胞增殖能力的影响,碱性磷酸酶试剂盒检测褪黑素对成骨细胞分化能力的影响以及应用Histone DNA Elisa凋亡试剂盒检测褪黑素对成骨细胞凋亡能力的影响。结果表明,褪黑素以浓度依赖性的方式抑制成骨细胞的增殖(图3.1A),抑制成骨细胞的分化(图3.1B)并诱导其凋亡(图3.1C)3.2 褪黑素抑制成骨细胞成骨相关基因的表达

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3470291