不同浓度右美托咪定对糖氧剥夺/再灌注诱导神经细胞凋亡的影响

发布时间：2021-11-22 15:22

　　目的研究不同浓度右美托咪定对糖氧剥夺/再灌注（OGD/R）诱导神经细胞凋亡的保护作用。方法应用全反式维甲酸（ATRA）和十四烷酰佛波醇乙酯酸（TPA）序贯诱导人源性神经母细胞瘤（SH-SY5Y）分化为神经细胞,均分为六组。选择OGD12h/R12h构建OGD/R模型。D0、D1、D2、D3、D4、D5组在OGD开始即刻分别加入右美托咪定0、0.1、1、10、100、1 000μmol/L。于再灌注12h后,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞凋亡法检测细胞凋亡水平,以观察不同浓度右美托咪定对OGD/R诱导神经细胞凋亡的保护作用。随后选择保护效果确切组,应用Westernblot法检测内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激特异性蛋白-中脑星形胶质细胞源性神经营养因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）含量以及促凋亡蛋白Caspase-3活性和CHOP含量。结果与D0组比较,D1、D2组细胞存活率和细胞凋亡率差异无统计学意义;D4、D5组细胞存活率明显下降,细胞凋亡率明显升高（P<... 

【文章来源】：临床麻醉学杂志. 2017,33(08)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

ａＰ＜０．０１图１Ｄ０组与Ｄ３组神经细胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３与ＣＨＯＰ表达水平的比较注：与Ｄ０组

蕊J‘砂n3组

ＭＡＮＦ及促凋亡蛋白的关系。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测显示：与Ｄ０组比较，右美托咪定１０μＭ明显上调了ＭＡＮＦ的表达（Ｐ＜０．０１），并抑制了促凋亡蛋白ｃａｓｐａｓｅ－３和ＣＨＯＰ的表达（Ｐ＜０．０１）（图１）。注：与Ｄ０组比较，ａＰ＜０．０１图１Ｄ０组与Ｄ３组神经细胞ＭＡＮＦ、ｃａｓｐａｓｅ－３与ＣＨＯＰ表达水平的比较Ｄ３组细胞存活率明显高于，细胞凋亡率明显低于Ｄ０组（Ｐ＜０．０１），Ｄ４、Ｄ５组细胞存活率明显低于，细胞凋亡率明显高于Ｄ０组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）（表１，图２）。表１六组ＯＧＤ／Ｒ后神经细胞的存活率和凋亡率的比较（％）组别存活率凋亡率Ｄ０组５２．１５±０．９６４８．５５±１．５９Ｄ１组５１．７２±１．９６４８．３４±１．１８Ｄ２组５１．９７±０．３９５２．２１±０．９４Ｄ３组６４．７８±２．７６ａ３１．０９±０．８３ａＤ４组４５．６９±２．３０ｂ６１．２８±１．３１ａＤ５组１９．９３±４．２２ａ９６．８７±１．３８ａ注：与Ｄ０组比较，ａＰ＜０．０１，ｂＰ＜０．０５讨论近些年来关于右美托咪定的神经保护作用报道很多［８］，但具体的细胞水平的作用机制仍不明确。本研究根据以往的研究方法［６，９］，通过ＡＴＲＡ与ＴＰＡ序贯成功诱导ＳＨ－ＳＹ５Ｙ分化为成熟神经元细胞表型，继而以细胞实验先期剥夺糖氧，后期再灌图２ＯＧＤ／Ｒ后流式细胞凋亡检测结果注复氧的ＯＧＤ／Ｒ模型模拟临床缺血－再灌

【参考文献】：
期刊论文
[1]中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子对糖氧剥夺/再灌注诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用[J]. 孙瑞,刘珺,沈玉君,沙曼琪,徐胜春,沈玉先.  中国药理学通报. 2015(06)
[2]MANF对内质网应激诱导的细胞凋亡的保护作用[J]. 陈滢,李成锦,杨文,程里,安然,都建,沈玉君,冯利杰,沈玉先.  安徽医科大学学报. 2013(11)
[3]体外诱导SH-SY5Y细胞凋亡的氧糖剥离再灌注模型的建立及评价[J]. 刘守跃,张影,胡林森,罗毅男,关文明.  吉林大学学报(医学版). 2012(04)



本文编号：3511967