探究人BMSCs通过共培养对人瘢痕疙瘩成纤维细胞DNMT1的影响
发布时间：2021-11-29 02:12
研究背景瘢痕疙瘩为结缔组织过度增生和透明变形而引起的良性皮肤病变。目前瘢痕疙瘩形成原因尚未明确,虽然临床上有多种治疗瘢痕疙瘩的方法,但均各有利弊,且单一方法疗效差,复发率高,不能令医生及患者满意。有研究发现KFs中存在DNA甲基化现象,DNMT1表达明显增高,表明DNMT1在瘢痕疙瘩生长过程中起重要的作用。且发现通过DNMT1的抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷可以调节KFs中TGF-β/Smad这一重要的信号通路,使KFs中TGF-β1、Coll-Ⅰ蛋白质表达下降,抑制型Smad7蛋白表达回升。间充质干细胞在预防和治疗皮肤瘢痕的领域已取得较好成效,且有研究发现人骨髓间充质干细胞（BMSCs）条件培养基抑制KFs的增殖、迁移,抑制KFs中TGF-β的分泌及胶原的合成,但产生影响的具体机制尚不明确。我们发现骨髓间充质干细胞培养液及DNMT1的抑制剂均可使瘢痕疙瘩成纤维细胞中TGF-β1的表达降低,故我们猜想BMSCs是否通过抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞DNA的甲基化而对TGF-β/Smad信号通路产生影响,进而影响KFs的增殖及细胞外基质的合成。本实验通过Transwell小室构建间接细胞共培养体系...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人BMSCs表面标志抗原Fig.2TheexpressionofantigensinthecellhumanofBMSCs
免疫细胞化学染色 KFs（×200） 免疫细胞化学染色 KFs（×400）图 3 瘢痕疙瘩成纤维细胞的鉴定Fig.3 The identification of the human keloid fibroblasts2.3.2 通过 HE 染色及免疫化学方法对人正常皮肤成纤维细胞进行鉴定HE 染色显示细胞为多角形或梭形,免疫细胞化学染色显示细胞波形蛋白表达呈阳性，排列较为规则，呈放射状或螺旋状，故鉴定该细胞为人正常皮肤成纤维细胞，图片如下：
(×200)图 5 培养 48h 后细胞图片A.NHDF 细胞组，B.NHDF 细胞共培养组，C.KF 细胞组，D.KF 细胞共培养组。Fig.5 Effects of co-culturing on fibroblasts morphology were observed under invertedmicroscope after 48hA. NHDFs group B. co-cultured NHDFs group C.KFs group D.co-cultured KFs group3 讨论瘢痕疙瘩是一种良性纤维增生性肿瘤，其起源于皮肤的创伤。瘢痕疙瘩组织的特征是真皮和皮下组织中的细胞外基质（ECM）成分，尤其是胶原蛋白的过度积累并延伸超出原始伤口部位的范围。且瘢痕疙瘩会持续增长，很少会自然消退[ 1 ][ 2 ] [ 3 ]。瘢痕疙瘩会导致瘙痒，疼痛，严重的情况下，会导致关节运动受限，影响患者生活质量。而成纤维细胞是导致正常和异常伤口愈合中胶原和 ECM 沉积的主要原因。这一过程主要由 TGF-β，PDGF，成纤维细胞生长因子β（FGF-β）和胰岛
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪来源干细胞对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖影响的分子机制[J]. 李响,吴志贤,刘宏伟,梁杰,莫自增. 中国组织工程研究. 2019(01)
[2]调节骨髓间充质干细胞的微环境因素研究进展[J]. 陈雪,邓子翔,牛云飞. 实用骨科杂志. 2018(08)
[3]瘢痕疙瘩治疗的研究进展[J]. 刘青武,王思丹,陈静,罗莎,冯放,王爱娟,杨顶权. 实用皮肤病学杂志. 2018(02)
[4]间充质干细胞抑制病理性瘢痕形成作用机制的研究进展[J]. 王欣,刘文军,李晓庆,段建兴,周丽娜,张艳玲,魏亚婷. 山东医药. 2018(12)
[5]瘢痕疙瘩的治疗新进展[J]. 房渊,郝平,张辉,王曙曼. 临床医药实践. 2018(03)
[6]间充质干细胞防治病理性瘢痕机制的研究进展[J]. 余立江,王晓军,龙笑. 中国医学科学院学报. 2017(04)
[7]瘢痕疙瘩发病机制的研究进展[J]. 张大维,吴波. 四川医学. 2017(06)
[8]瘢痕疙瘩发病机制的分子生物学研究进展[J]. 陈森,李养群. 医学研究杂志. 2017(05)
[9]瘢痕疙瘩发病机制的研究[J]. 朱莲花,李美玲,李周娜,金哲虎. 中国皮肤性病学杂志. 2017(05)
[10]间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞及瘢痕成纤维细胞转化生长因子β产生和信号通路的影响[J]. 武艳,袁晓环,杨岚,赵孝金,李厚忠,王莹,金红. 中国组织工程研究. 2016(29)
博士论文
[1]脂肪来源间充质干细胞旁分泌因子抗病理性瘢痕成纤维细胞纤维化的作用及分子机制的研究[D]. 韩兵.北京协和医学院 2018
[2]脂肪干细胞微环境对衰老成纤维细胞作用及机制的研究[D]. 申霄.重庆医科大学 2016
硕士论文
[1]免疫反应及TGF-β/Smads信号通路在瘢痕形成中的研究进展[D]. 李婉迪.北京协和医学院 2017
本文编号：3525627
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
人BMSCs表面标志抗原Fig.2TheexpressionofantigensinthecellhumanofBMSCs
免疫细胞化学染色 KFs（×200） 免疫细胞化学染色 KFs（×400）图 3 瘢痕疙瘩成纤维细胞的鉴定Fig.3 The identification of the human keloid fibroblasts2.3.2 通过 HE 染色及免疫化学方法对人正常皮肤成纤维细胞进行鉴定HE 染色显示细胞为多角形或梭形,免疫细胞化学染色显示细胞波形蛋白表达呈阳性，排列较为规则，呈放射状或螺旋状，故鉴定该细胞为人正常皮肤成纤维细胞，图片如下：
(×200)图 5 培养 48h 后细胞图片A.NHDF 细胞组，B.NHDF 细胞共培养组，C.KF 细胞组，D.KF 细胞共培养组。Fig.5 Effects of co-culturing on fibroblasts morphology were observed under invertedmicroscope after 48hA. NHDFs group B. co-cultured NHDFs group C.KFs group D.co-cultured KFs group3 讨论瘢痕疙瘩是一种良性纤维增生性肿瘤，其起源于皮肤的创伤。瘢痕疙瘩组织的特征是真皮和皮下组织中的细胞外基质（ECM）成分，尤其是胶原蛋白的过度积累并延伸超出原始伤口部位的范围。且瘢痕疙瘩会持续增长，很少会自然消退[ 1 ][ 2 ] [ 3 ]。瘢痕疙瘩会导致瘙痒，疼痛，严重的情况下，会导致关节运动受限，影响患者生活质量。而成纤维细胞是导致正常和异常伤口愈合中胶原和 ECM 沉积的主要原因。这一过程主要由 TGF-β，PDGF，成纤维细胞生长因子β（FGF-β）和胰岛
【参考文献】：
期刊论文
[1]脂肪来源干细胞对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖影响的分子机制[J]. 李响,吴志贤,刘宏伟,梁杰,莫自增. 中国组织工程研究. 2019(01)
[2]调节骨髓间充质干细胞的微环境因素研究进展[J]. 陈雪,邓子翔,牛云飞. 实用骨科杂志. 2018(08)
[3]瘢痕疙瘩治疗的研究进展[J]. 刘青武,王思丹,陈静,罗莎,冯放,王爱娟,杨顶权. 实用皮肤病学杂志. 2018(02)
[4]间充质干细胞抑制病理性瘢痕形成作用机制的研究进展[J]. 王欣,刘文军,李晓庆,段建兴,周丽娜,张艳玲,魏亚婷. 山东医药. 2018(12)
[5]瘢痕疙瘩的治疗新进展[J]. 房渊,郝平,张辉,王曙曼. 临床医药实践. 2018(03)
[6]间充质干细胞防治病理性瘢痕机制的研究进展[J]. 余立江,王晓军,龙笑. 中国医学科学院学报. 2017(04)
[7]瘢痕疙瘩发病机制的研究进展[J]. 张大维,吴波. 四川医学. 2017(06)
[8]瘢痕疙瘩发病机制的分子生物学研究进展[J]. 陈森,李养群. 医学研究杂志. 2017(05)
[9]瘢痕疙瘩发病机制的研究[J]. 朱莲花,李美玲,李周娜,金哲虎. 中国皮肤性病学杂志. 2017(05)
[10]间充质干细胞条件培养液对正常成纤维细胞及瘢痕成纤维细胞转化生长因子β产生和信号通路的影响[J]. 武艳,袁晓环,杨岚,赵孝金,李厚忠,王莹,金红. 中国组织工程研究. 2016(29)
博士论文
[1]脂肪来源间充质干细胞旁分泌因子抗病理性瘢痕成纤维细胞纤维化的作用及分子机制的研究[D]. 韩兵.北京协和医学院 2018
[2]脂肪干细胞微环境对衰老成纤维细胞作用及机制的研究[D]. 申霄.重庆医科大学 2016
硕士论文
[1]免疫反应及TGF-β/Smads信号通路在瘢痕形成中的研究进展[D]. 李婉迪.北京协和医学院 2017
本文编号：3525627
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