CLARITY技术平台的建立及其在肠组织结构研究中的应用

发布时间：2021-12-16 10:51

　　目的:建立CLARITY技术所需实验平台,并探索通过CLARITY技术制备透明肠组织所需要的实验条件,建立可靠的透明肠组织的制备方法;通过对CLARITY技术制备的透明肠组织结构的观察,探讨该技术用于胃肠动力领域研究的可行性。方法:1.CLARITY技术实验平台的建立所需仪器主要包括通风橱、氮气罐、真空泵、4℃冰箱、水浴箱、电泳槽、铂电极、恒温搅拌反应浴、蠕动泵、电泳仪、标本盒、分流器和过滤器等,其中电泳设备的主要由电泳槽、铂电极、恒温搅拌反应浴、蠕动泵、电泳仪等通过橡胶软管路及电路连接组成。12.取7周龄荧光小鼠8只,分为对照组（A组）、实验组（B组）两组,A组为采用传统小鼠组织切片;B组采用CLARITY技术制备小鼠透明组织。A组,截取长约2mm十二指肠远端标本,4%多聚甲醛固定。将组织块经冰冻后,沿垂直于小肠长轴方向进行连续切片,观察组织切片结构。B组小鼠行水凝胶心脏灌注、胃肠组织水凝胶包埋、水凝胶电泳、折射率均匀化,通过双光子显微镜观察组织结构。结果:1.通过参考相关文献购买所需实验器材,构建并完善CLARITY技术实验平台,探索成熟的透明组织制备方法。2.两组标本制备完成后,... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CLARITY技术步骤示意图

电泳设备A为恒温搅拌反应浴，B为蠕动泵，C为电泳仪

兰州大学硕士学位论文 CLARITY 技术设备的构建及其用于肠道组织结构的研究7） 橡胶软管及电线：橡胶软管需耐高温及腐蚀，用于 SDS 洗涤液与电泳槽之间的流通；电线及鳄鱼夹用于电泳仪及电泳槽之间的连接。8） 分流器和过滤器：过滤器用于对缓冲液及标本杂质的过滤。分流器则用于对缓冲液的分流，以便多个标本同时进行电泳。

【参考文献】：
期刊论文
[1]胃肠运动失调性疾病中Cajal间质细胞功能失调机制研究进展[J]. 董方,贺晨宇,商建峰,陈东.  中华病理学杂志. 2017 (11)
[2]生物组织光学透明技术研究进展[J]. 李亚敏,薛成志,李贵叶,胡章立,阮双琛,陈玲玲.  生物学杂志. 2017(06)
[3]Intestinal neuronal dysplasia type B: A still little known diagnosis for organic causes of intestinal chronic constipation[J]. Pedro Luiz Toledo de Arruda Louren??o,Simone Antunes Terra,Erika Veruska Paiva Ortolan,Maria Aparecida Marchesan Rodrigues.  World Journal of Gastrointestinal Pharmacology and Therapeutics. 2016(03)
[4]肠神经系统的基础与临床研究进展[J]. 方秀才.  临床消化病杂志. 2009(02)



本文编号：3538007