褪黑素调控DNA甲基化对人增生性瘢痕成纤维细胞转化的影响

发布时间：2021-12-16 17:34

　　第一部分褪黑素对人增生性瘢痕成纤维细胞DNA甲基化的影响目的:探讨褪黑素对人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFB）DNA甲基化的影响方法:1.收集人增生性瘢痕组织12例,组织块法分离培养取第4代人增生性瘢痕成纤维细胞,用免疫细胞化学法（ICC）鉴定成纤维细胞。2.酶消化法消化细胞,接种于96孔板中,分别加入不同浓度褪黑素组(0、1x10^-5、1x10^-3、1mmol/L)。分组培养48h后,采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（WST-1）检测成纤维细胞增殖活性,倒置显微镜观察其形态变化,选取合适浓度的褪黑素实验组作为后续实验组用药浓度;3.实验分成两组:（1）对照组:细胞消化传代后,加入4ml FBS,培养48h;（2）褪黑素组:细胞消化传代后,加入含有褪黑素浓度为10^-3mmol/L的10%FBS 4ml,培养48小时后收集细胞;采用荧光定量聚合酶反应（realtime fluorescence quantitative PCR,RT-PCR）和免疫印迹法（Western Blot）检测对照组与褪黑素组间成纤维细胞DNMT1 ... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

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人增生性瘢痕成纤维细胞形态及鉴定（倒置相差显微镜x10A：组织块法培养成纤维

暨南大学硕士学位论文16图2不同浓度褪黑素对成纤维细胞形态的影响（倒置相差显微镜x10A：对照组B：1x10-5mmol/L褪黑素C:1x10-3mmol/L褪黑素D:1mmol/L褪黑素）3.褪黑素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响WST-1结果显示：（1）对照组和褪黑素浓度为1x10-5mmol/L组相比，成纤维细胞的增殖活力无统计学意义（P＞0.05）；（2）与对照组相比，褪黑素浓度为1x10-3、1mmol/L对人瘢痕成纤维细胞的增殖具有抑制作用，成纤维细胞增殖活力明显低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；（3）褪黑素浓度为1mmol/L与浓度为1x10-5、1x10-3mmol/L的褪黑素组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05。根据实验结果所示，选取浓度为10-3mmol/L作为后续实验组用药浓度（如图2，表2，图3）；

表 3 褪黑素对 HSFB 中 DNMT1 mRNA 表达的影响（n=10，x±s）组别 DNMT1 mRNA 表达量对照组 1.00±0.082褪黑素组 1.86±0.094** 与对照组比较，P＜0.05

【参考文献】：
期刊论文
[1]褪黑素对兔耳增生性瘢痕Ⅰ、Ⅲ型胶原的影响[J]. 张益勋,武明伟,胡逸萍,钟穗航,刘志勇,魏文龙,谢有富.  中华实验外科杂志. 2018 (10)
[2]褪黑素对大鼠肝纤维化的保护作用及其对TGF-β1表达的影响[J]. 汪玉荣,洪汝涛,谢园园.  安徽医科大学学报. 2016(09)
[3]烧伤创面愈合后瘢痕组织成纤维细胞DNA甲基化初步研究[J]. 杨娥,张恒术.  中国烧伤创疡杂志. 2015(03)
[4]褪黑激素对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响[J]. 谢有富,张俊成,刘思隽,戴丽冰,杜高伟.  中华烧伤杂志. 2011 (06)
[5]肌成纤维细胞在皮肤瘢痕形成过程中的作用[J]. 章伏生,陆树良.  中华创伤杂志. 2009 (12)
[6]深Ⅱ度烧伤早期及愈后增生性瘢痕组织中p16基因表达的甲基化调控[J]. 姚庆君,陈璧,胡大海,徐明达,董茂龙,王树森.  第四军医大学学报. 2005(04)

博士论文
[1]褪黑素对神经干细胞分化命运的影响及表观遗传学机制研究[D]. 李羡.山东大学 2017

硕士论文
[1]褪黑激素对增生性瘢痕形成影响的动物实验研究[D]. 武明伟.暨南大学 2014
[2]褪黑激素对增生性瘢痕成纤维细胞转化的影响及机制研究[D]. 杜高伟.暨南大学 2013
[3]褪黑素与增生性瘢痕关系的研究[D]. 张俊成.暨南大学 2010



本文编号：3538540