BMSCs分泌GDNF调控小胶质细胞分化治疗去神经传入性疼痛的实验研究

发布时间：2021-12-25 04:17

　　目的:1.体外实验研究BMSCs调控小胶质细胞分化的作用及其机制;2.体内实验研究BMSCs髓内移植治疗去神经传入性疼痛的作用及机制。方法:1.体外实验中用脂多糖刺激小胶质细胞模拟神经炎症发生发展,再与BMSCs、GDNF或siRNA GDNF-BMSCs共培养,采用RT-PCR法和ELISA法检测IL-1β、TNF-α与IL-10的表达水平;用RT-PCR法和流式细胞仪检测小胶质细胞表面标志物表达水平,Western blot法检测小胶质细胞内pNF-κb、pPI3K、pAKT的表达水平;2.体内实验中制作去神经传入性疼痛动物模型,于术后21天髓内移植BMSCs或GDNF-siRNA BMSCs,移植治疗7天后检测其行为学变化,主要观察其疼痛相关行为的改变,同时取血清标本进行RT-PCR法和ELISA法检测IL-1β、TNF-α与IL-10的表达水平,取损伤处脊髓标本制作石蜡切片,免疫荧光共定位检测小胶质细胞分型;Western blot法检测pNF-κb、pPI3K、pAKT的表达水平;3.选择IBM SPSS Statics 20.0软件统计处理实验数据,计数实验数据以平均数±标... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１大鼠ＢＭＳＣ的鉴定和ＧＤＮＦ的分泌??ＦＩＧＵＲＥ?１－１?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｎｄ?

图１－３?ＧＤＮＦ?ｓｉＲＮＡ有效阻断ＢＭＳＣ分泌ＧＤＮＦ??ＦＩＧＵＲＥ?１－３?ＧＤＮＦ?ｓｉＲＮＡ?ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ?ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ＧＤＮＦ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ??

?項士学位论文???４．?ＢＭＳＣ通过分泌ＧＤＮＦ调控ＤＰ大鼠受损脊髓组织中ＮＦ－ｋＢ及ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号??通路的活化??如图２－５所示，与Ｓｈａｍ组相比，在ＤＰ组中，ｐＮＦ－ＫＢ的表达显着增力Ｐ，而ｐＰＩ３Ｋ??和ｐＡＫＴ没有明显变化。移植ＢＭＳＣｓ后，ｐＮＦ－ＫＢ的表达明显下调，而ｐＰＩ３Ｋ和??ｐＡＫＴ的表达明显上调。因此，ＢＭＳＣｓ在促进ＤＰ大鼠ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ表达的同时下调??了ＮＦ－ｋＢ的激活。然而，用ｓｉＲＮＡ沉默ＢＭＳＣｓ中ＧＤＮＦ表达后，ＢＭＳＣｓ的这些作??用明显减弱，表明ＢＭＳＣｓ通过分泌ＧＤＮＦ抑制ＮＦ－ｋＢ和的表达并促进了ＰＩ３Ｋ?／??ＡＫＴ信号通路的表达，进而缓解大鼠ＤＰ。??ｐＮ?Ｆ－ＫＢ?？靜?＿＿＿＿＿＿？｜｜？??ｐＰＩ３Ｋ?—丨「＿?—?一厂．旧．．．一＿＿＿丨＿丨丨丨Ｉ丨丨丨丨丨？丨??ｐＡＫＴ?—，一＊?？——?一??＜／?／?＜／??Ｉ４］?＃?Ｂ?〇ｉ?２．５－｜?Ｃ??一?丁?＞?？??０?３－?ｉ－ｐＪ—｜?＊?①?丁??１?、ｉ?＂?ｃ２°－?．??Ｐ１！?＇Ｉ?１．５－?”?ｊ?内?？?Ｖ?Ｉ??１?■?ｉｉｉ?■?１１?卜．〇－■?＿ｎ??°＾—?＞?■?■?ｄａ?ｄｅａｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ?ｍｏｄｅｌ??，Ｚ?＾?Ｚ?？?０＊５－?■?■?Ｉ?ｃａ?ｓｉＧＤＮＰ?ＢＭＳＣ??ａ．?〇，〇?■?１．１，３?＿Ｂ?ｌａ，！?Ｕ?Ｃ３?ＢＭＳＣ??ｐＰＩ３Ｋ?ｐＡＫＴ??图２－５?ＢＭＳＣｓ通过ＧＤＮＦ调控ＤＰ大鼠的ＮＦ－ｋＢ和ＰＩ３Ｋ?／ＡＫＴ信号通路??ＦＩＧＵＲＥ?２－５?ＢＭＳＣｓ?ｒｅｇｕｌａｔ


本文编号：3551772