他克莫司下调miR-429抑制人成纤维细胞增殖的研究
发布时间：2022-01-10 08:25
目的:探究他克莫司通过下调miR-429抑制人成纤维细胞增殖来预防瘢痕粘连的作用及其潜在的作用机制。方法:为了确定术后瘢痕组织中miR-429的表达情况,我们将取自人体术后瘢痕组织中提取的RNA进行了qRT-PCR检测;并将体外培养的人成纤维细胞,分别用0μM和50μM浓度的FK-506溶液处理24h,也采用qRT-PCR检测用两者结果分析他克莫司作用对人成纤维细胞中miR-429的影响。采用Western-blot检测了人瘢痕成纤维细胞在转染miR-429模拟物和对照物后PTEN表达量的变化。通过在线miRNA靶点预测数据库,预测了潜在的miR-429的靶标基因PTEN,并依据预测的位点构建了PTEN’3-UTR的野生型、突变型质粒,之后采用双荧光素酶报告检测确定miR-429和PTEN的靶向关系。将FK-506作用的成纤维细胞分为浓度组（0,5,10,25,50,100μM）和时间组（0,12,24,36,48,60h）,通过CCK-8实验检测FK-506对体外培养的人成纤维细胞增殖活性的影响。将经过FK-506处理和miR-429慢病毒转染的成纤维细胞进行不同分组（对照组,FK-...
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：39 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
从人体瘫痕组织中分离、培养的成纤维细胞镜下形态，x1000
大连医科大学硕士学位论文3.实验结果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纤维细胞中的表达为了确定人瘢痕组织中 miR-429 的表达情况，我们将样本组织中提取的 RNA 进行了qRT-PCR 检测，并将不同样本组织分组进行了对比，结果根据图 1-2 显示的情况，人瘢痕组织中 miR-429 相对正常组织中 miR-429 的表达增加。为了确定他克莫司对人成纤维细胞中 miR-429 表达的影响，我们用 50μM 的 FK-506 单次施用 5 分钟处理人成纤维细胞，之后立即用 PBS 洗涤三次，随后培养 24h，然后使用 qRT-PCR 测 miR-429 的表达。结果如图 1-3 显示，经过 FK-506 处理的纤维细胞中 miR-429 的水平显着低于对照成纤维细胞中的水平。这些结果表明 FK-506 可以下调人成纤维细胞中 miR-429 的表达。
大连医科大学硕士学位论文3.实验结果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纤维细胞中的表达为了确定人瘢痕组织中 miR-429 的表达情况，我们将样本组织中提取的 RNA 进行了qRT-PCR 检测，并将不同样本组织分组进行了对比，结果根据图 1-2 显示的情况，人瘢痕组织中 miR-429 相对正常组织中 miR-429 的表达增加。为了确定他克莫司对人成纤维细胞中 miR-429 表达的影响，我们用 50μM 的 FK-506 单次施用 5 分钟处理人成纤维细胞，之后立即用 PBS 洗涤三次，随后培养 24h，然后使用 qRT-PCR 测 miR-429 的表达。结果如图 1-3 显示，经过 FK-506 处理的纤维细胞中 miR-429 的水平显着低于对照成纤维细胞中的水平。这些结果表明 FK-506 可以下调人成纤维细胞中 miR-429 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]喉内植入硅胶膜预防和治疗双侧声带粘连[J]. 陈健,吴海涛,程磊,何培杰. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2018(23)
[2]Mitomycin C induces apoptosis in human epidural scar fibroblasts after surgical decompression for spinal cord injury[J]. Tao Sui,Da-wei Ge,Lei Yang,Jian Tang,Xiao-jian Cao,Ying-bin Ge. Neural Regeneration Research. 2017(04)
本文编号：3580384
【文章来源】：大连医科大学辽宁省
【文章页数】：39 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
从人体瘫痕组织中分离、培养的成纤维细胞镜下形态，x1000
大连医科大学硕士学位论文3.实验结果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纤维细胞中的表达为了确定人瘢痕组织中 miR-429 的表达情况，我们将样本组织中提取的 RNA 进行了qRT-PCR 检测，并将不同样本组织分组进行了对比，结果根据图 1-2 显示的情况，人瘢痕组织中 miR-429 相对正常组织中 miR-429 的表达增加。为了确定他克莫司对人成纤维细胞中 miR-429 表达的影响，我们用 50μM 的 FK-506 单次施用 5 分钟处理人成纤维细胞，之后立即用 PBS 洗涤三次，随后培养 24h，然后使用 qRT-PCR 测 miR-429 的表达。结果如图 1-3 显示，经过 FK-506 处理的纤维细胞中 miR-429 的水平显着低于对照成纤维细胞中的水平。这些结果表明 FK-506 可以下调人成纤维细胞中 miR-429 的表达。
大连医科大学硕士学位论文3.实验结果3.1 FK-506 能降低 miR-429 在人成纤维细胞中的表达为了确定人瘢痕组织中 miR-429 的表达情况，我们将样本组织中提取的 RNA 进行了qRT-PCR 检测，并将不同样本组织分组进行了对比，结果根据图 1-2 显示的情况，人瘢痕组织中 miR-429 相对正常组织中 miR-429 的表达增加。为了确定他克莫司对人成纤维细胞中 miR-429 表达的影响，我们用 50μM 的 FK-506 单次施用 5 分钟处理人成纤维细胞，之后立即用 PBS 洗涤三次，随后培养 24h，然后使用 qRT-PCR 测 miR-429 的表达。结果如图 1-3 显示，经过 FK-506 处理的纤维细胞中 miR-429 的水平显着低于对照成纤维细胞中的水平。这些结果表明 FK-506 可以下调人成纤维细胞中 miR-429 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]喉内植入硅胶膜预防和治疗双侧声带粘连[J]. 陈健,吴海涛,程磊,何培杰. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2018(23)
[2]Mitomycin C induces apoptosis in human epidural scar fibroblasts after surgical decompression for spinal cord injury[J]. Tao Sui,Da-wei Ge,Lei Yang,Jian Tang,Xiao-jian Cao,Ying-bin Ge. Neural Regeneration Research. 2017(04)
本文编号：3580384
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