COX2对骨肉瘤MG63细胞转移侵袭迁移的调控及其分子机制探索
发布时间：2022-01-14 01:45
目的基于PI3K/AKT/NOTCH/Wnt轴探索COX2对骨肉瘤细胞转移及EMT的影响,为抗骨肉瘤药物开发提供分子基础和潜在的分子靶点。方法1采用Ad Easy腺病毒转染系统构建COX2高表达MG63细胞株;并分组为（1）Blank组:不做任何处理的正常培养的MG63细胞;（2）plvx-Ds Red组:感染空载体腺病毒plvx-Ds Red的MG63细胞;（3）plvx-COX2-Ds Red组:感染重组腺病毒plvx-COX2-Ds Red的MG63细胞;细胞免疫荧光实验检测载体是否转染成功;Wetern bloting实验和q PCR实验检测各组细胞中COX2的表达。2细胞分组:（1）Blank组:不做任何处理的正常培养的MG63细胞;（2）plvx-Ds Red组:感染空载体腺病毒plvx-Ds Red的MG63细胞;（3）plvx-COX2-Ds Red组:感染重组腺病毒plvx-COX2-Ds Red的MG63细胞;（4）COX2+NS398组:plvx-COX2-Ds Red组细胞用COX2抑制剂NS398 5μM处理24h的细胞;（5）COX2+EP4A组:plvx-...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
腺病毒载体转染MG63细胞的GRP变化（200），GRP：红色荧光蛋白
C 各组细胞中 COX2 蛋白及 mRNA 表达变化，A：Western blotWestern bloting 实验条带的统计分析；C：qRCR 实验结果分析与 Blank 组相比，**P＜0.01。 在多数肿瘤中均表现出促癌的作用[139, 140]，但其在骨肉瘤中的乏相关的文献，本研究为探索 COX2 在骨肉瘤中的作用及其选取 MG63 细胞作为研究对象，以腺病毒作为载体构建高表达研究中采用的转染系统为 AdEasy 腺病毒转染系统。该转染系体 pAdEasy-1、穿梭质粒 pAdTrack-CWV、包装细胞 HEK29E.coli BJ5183构成。骨架载体pAdeasy-1是由长度为36kb的双病毒 Adenovirus 改造而来。该腺病毒可通过受体介导的内吞后腺病毒基因组转移至细胞核内，保持在染色体外，不整合进
胞增殖情况的相对变化（n=6），与Blank组相比，**P＜0.01；与 plvx-CO组相比，##P＜0.01.胞迁移能力的变化ank 组相比，plvx-DsRed 组细胞迁移数目有略微下降，但无显5），plvx-COX2-DsRed 组细胞迁移数目显著上升，差异有统计；与 plvx-COX2-DsRed 组细胞相比，COX2＋NS398 组、COX数目显著下降，差异有统计学意义（P＜0.05），COX2＋NSA 组细胞迁移数目之间相比无明显变化，差异无统计学意
【参考文献】：
期刊论文
[1]Twist调控骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭[J]. 何昀,方姝煜,毕杨,何通川,王佚,洪思琦. 南方医科大学学报. 2018(05)
[2]葡萄糖转运蛋白-1通过Wnt/β-catenin通路促进骨肉瘤MG63细胞迁移[J]. 郝俊龙,王亚鹏,杨凯,齐进,王旭,汪静. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(05)
[3]Twist对膀胱癌细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 王刚,杨涛,彭克楠,郭留雄,孙福振,谷守义,刘俊江. 中国老年学杂志. 2018(10)
[4]干扰ROR1基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的上皮-间质转化[J]. 王兴文,移志刚,赵鑫,张津,丁界先,蒲彦川,马静琳,汪静,王栓科. 肿瘤. 2018(03)
[5]前列腺素E2在癌症发生发展中的研究进展[J]. 蒋彩虹,高子蕊,郭丽凯,章琳琪,范天睿,王月丹,初明. 生理科学进展. 2018(01)
[6]NOK在骨肉瘤细胞系MG63 EMT过程中的作用[J]. 王兆宁,郑立峰,陈岩,王宝,王可,王居正. 现代生物医学进展. 2018(03)
[7]COX-2活化PI3K/Akt信号通路促结直肠癌肝转移的实验研究[J]. 闫康鹏,江长安,吴昆. 中国医学创新. 2017(35)
[8]沉默RIPK4基因表达可抑制骨肉瘤U-2OS细胞上皮-间质转化的发生[J]. 移志刚,王兴文,蒲彦川,周开升,陈永刚,安江东,马静琳,汪静,王栓科. 肿瘤. 2016(10)
[9]COX-2/PGE2与肿瘤相关免疫细胞[J]. 杨燕,李晓东,季枚,蒋敬庭,吴昌平. 临床检验杂志. 2016(04)
[10]Notch与NF-κB信号通路串话的研究进展[J]. 谢苍桑,林玲. 福建医药杂志. 2009(06)
博士论文
[1]Twist在骨肉瘤转移和上皮间质转化中作用及机制[D]. 尹科.中南大学 2013
[2]肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌耐药中的作用及分子机制研究[D]. 李洪忠.重庆医科大学 2013
硕士论文
[1]PGE2通过PI3K/AKT信号转导通路激活CREB促进胆管癌生长侵袭的研究[D]. 戎荣.南京医科大学 2014
[2]Notch与NF-κB信号通路的串话在乙肝相关性肝癌发生中的作用[D]. 周海燕.华中科技大学 2011
[3]NSAIDs对lovo结肠癌细胞株COX-2、hmLH1、hmSH2、Bcl-2、caspase-3蛋白的影响及抗肿瘤机制的初步研究[D]. 哈雪梅.河北医科大学 2010
本文编号：3587560
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
腺病毒载体转染MG63细胞的GRP变化（200），GRP：红色荧光蛋白
C 各组细胞中 COX2 蛋白及 mRNA 表达变化，A：Western blotWestern bloting 实验条带的统计分析；C：qRCR 实验结果分析与 Blank 组相比，**P＜0.01。 在多数肿瘤中均表现出促癌的作用[139, 140]，但其在骨肉瘤中的乏相关的文献，本研究为探索 COX2 在骨肉瘤中的作用及其选取 MG63 细胞作为研究对象，以腺病毒作为载体构建高表达研究中采用的转染系统为 AdEasy 腺病毒转染系统。该转染系体 pAdEasy-1、穿梭质粒 pAdTrack-CWV、包装细胞 HEK29E.coli BJ5183构成。骨架载体pAdeasy-1是由长度为36kb的双病毒 Adenovirus 改造而来。该腺病毒可通过受体介导的内吞后腺病毒基因组转移至细胞核内，保持在染色体外，不整合进
胞增殖情况的相对变化（n=6），与Blank组相比，**P＜0.01；与 plvx-CO组相比，##P＜0.01.胞迁移能力的变化ank 组相比，plvx-DsRed 组细胞迁移数目有略微下降，但无显5），plvx-COX2-DsRed 组细胞迁移数目显著上升，差异有统计；与 plvx-COX2-DsRed 组细胞相比，COX2＋NS398 组、COX数目显著下降，差异有统计学意义（P＜0.05），COX2＋NSA 组细胞迁移数目之间相比无明显变化，差异无统计学意
【参考文献】：
期刊论文
[1]Twist调控骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭[J]. 何昀,方姝煜,毕杨,何通川,王佚,洪思琦. 南方医科大学学报. 2018(05)
[2]葡萄糖转运蛋白-1通过Wnt/β-catenin通路促进骨肉瘤MG63细胞迁移[J]. 郝俊龙,王亚鹏,杨凯,齐进,王旭,汪静. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2018(05)
[3]Twist对膀胱癌细胞迁移、侵袭及MMP-2、MMP-9表达的影响[J]. 王刚,杨涛,彭克楠,郭留雄,孙福振,谷守义,刘俊江. 中国老年学杂志. 2018(10)
[4]干扰ROR1基因表达可抑制骨肉瘤MG-63细胞的上皮-间质转化[J]. 王兴文,移志刚,赵鑫,张津,丁界先,蒲彦川,马静琳,汪静,王栓科. 肿瘤. 2018(03)
[5]前列腺素E2在癌症发生发展中的研究进展[J]. 蒋彩虹,高子蕊,郭丽凯,章琳琪,范天睿,王月丹,初明. 生理科学进展. 2018(01)
[6]NOK在骨肉瘤细胞系MG63 EMT过程中的作用[J]. 王兆宁,郑立峰,陈岩,王宝,王可,王居正. 现代生物医学进展. 2018(03)
[7]COX-2活化PI3K/Akt信号通路促结直肠癌肝转移的实验研究[J]. 闫康鹏,江长安,吴昆. 中国医学创新. 2017(35)
[8]沉默RIPK4基因表达可抑制骨肉瘤U-2OS细胞上皮-间质转化的发生[J]. 移志刚,王兴文,蒲彦川,周开升,陈永刚,安江东,马静琳,汪静,王栓科. 肿瘤. 2016(10)
[9]COX-2/PGE2与肿瘤相关免疫细胞[J]. 杨燕,李晓东,季枚,蒋敬庭,吴昌平. 临床检验杂志. 2016(04)
[10]Notch与NF-κB信号通路串话的研究进展[J]. 谢苍桑,林玲. 福建医药杂志. 2009(06)
博士论文
[1]Twist在骨肉瘤转移和上皮间质转化中作用及机制[D]. 尹科.中南大学 2013
[2]肿瘤相关巨噬细胞在乳腺癌耐药中的作用及分子机制研究[D]. 李洪忠.重庆医科大学 2013
硕士论文
[1]PGE2通过PI3K/AKT信号转导通路激活CREB促进胆管癌生长侵袭的研究[D]. 戎荣.南京医科大学 2014
[2]Notch与NF-κB信号通路的串话在乙肝相关性肝癌发生中的作用[D]. 周海燕.华中科技大学 2011
[3]NSAIDs对lovo结肠癌细胞株COX-2、hmLH1、hmSH2、Bcl-2、caspase-3蛋白的影响及抗肿瘤机制的初步研究[D]. 哈雪梅.河北医科大学 2010
本文编号：3587560
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