miR-134通过调控MMP1和MMP3表达抑制骨肉瘤侵袭和转移的作用及其相关机制研究

发布时间：2022-01-21 20:15

　　目的:探究miR-134在骨肉瘤侵袭和转移中的作用及其相关作用机制,并为未来骨肉瘤临床治疗中新的治疗机制和作用靶点提供理论依据,为治疗骨肉瘤提供新思路。方法:（1）qRT-PCR检测人骨肉瘤细胞系Saos-2、MG-63及人软骨细胞系CHON-001中miR-134和MMP1及MMP3的表达情况,并比较其差异。免疫组织化学染色法检测人骨肉瘤样本及正常骨组织中MMP1和MMP3的表达差异情况。（2）利用慢病毒转染人骨肉瘤Saos-2细胞,qRT-PCR验证其转染效率,使其miR-134过表达,以转染miR-134-Control慢病毒的细胞作为对照组,通过细胞划痕实验检测miR-134对骨肉瘤细胞迁移能力的影响。质粒转染Saos-2细胞使其miR-134过表达,并通过Transwell实验检测miR-134对骨肉瘤细胞侵袭能力的影响。（3）利用慢病毒转染使其稳定高表达miR-134的骨肉瘤细胞系Saos-2,构建人骨肉瘤裸鼠移植移植瘤模型,检测miR-134在体内对骨肉瘤生长的影响;肺组织HE染色观察其对裸鼠体内骨肉瘤肺转移的影响,同时利用qRT-PCR、免疫组化、ELISA及Weste... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

AmiR-134在各细胞系中的表达；BMMP1和MMP3在各细胞系中的表达

图 2-2 MMP1 和 MMP3 在人骨肉瘤组织中呈高表达3 讨论先前的研究表明 miR-134 的过表达与骨肉瘤的病理进程有着密切的联系[29]，同时，基质金属蛋白酶在体内的表达也通过多种方式参与多种肿瘤的发生发展。本研究发现在骨肉瘤细胞及组织中，miR-134 与 MMP1 和 MMP3 的表达呈负相关，这与之前的研究即过表达 miR-134 可通过抑制 MMP7 及 MMP9 从而降低非小细胞肺癌肿瘤细胞的迁移和侵袭能力结论 致[34]。4 结论本研究中发现 miR-134 与 MMP1 和 MMP3 的表达呈负相关，提示 miR-134 的异常低

图 2-1 A 慢病毒转染后荧光表达效率；B 慢病毒转染后 miR-134 表达情况2.2 过表达 miR-134 抑制 Saos-2 细胞的迁移能力细胞划痕实验结果显示，miR-134 组细胞在 12h、24h 的迁移率均明显低于 Contro组细胞。见图 2-2，（**p＜0.001）。图 2-2 划痕实验 12h 和 24h 细胞迁移情况及迁移率的比较2.3 过表达 miR-134 抑制 Saos-2 细胞的侵袭能力


本文编号：3600890