低氧预处理人脂肪来源干细胞对皮肤成纤维细胞衰老作用影响的研究
发布时间：2022-01-24 13:06
目的探讨低氧预处理的人脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）和常氧处理的人脂肪来源干细胞在体外环境中对人皮肤真皮成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts,HDFs）衰老作用的影响。方法取正常成年人皮下脂肪组织和皮肤真皮组织,脂肪组织应用酶消化、真皮组织应用组织块法在体外进行分离、培养人脂肪来源干细胞（ADSCs）和人真皮成纤维细胞（HDFs）,并进行细胞鉴定;根据实验需要培养细胞、冻存。将生长状态良好的人脂肪来源干细胞进行传代培养,分别放入低氧培养工作站（1%O2、5%CO2、94%N2,37℃）和普通培养箱即常氧培养箱(21%O2、5%CO2、其余氮气平衡,37℃)培养,分别处理48小时后入组进行实验研究。实验设计为3组:空白对照组、实验组I、和实验组II。空白对照组为单纯培养真皮成纤维细胞;实验组I为常氧组、实验组II为低氧组,两组均采用悬挂式细胞培养皿（Transwell小室）构建ADSCs与HDFs之间非接...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1人脂肪干细胞（ADSCs）镜下形态
图 3.1.2 ADSCs 成脂、成骨诱导培养后染色。A：ADSCs 成脂诱导培养 14 天后，油红 O 结果，镜下见橘红色脂肪滴（×40）；B：ADSCs 成骨诱导培养 21 后，茜素红染色结果，镜橘红色典型钙化结节（×200）3.1.3 ADSCs 流式细胞仪鉴定表面标记物通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原，结果示：所培养细胞的 CD73、CD90 表达
通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原，结果示：所培养细胞的 CD73、CD90 表达大于 95%， CD34、CD45 表达均小于 10%，因此表明该细胞 CD73、CD90 为阳性表达CD34、CD45 为阴性表达，符合参考文献所述 ADSCs 表面标记物的特征，可鉴定所养的细胞为 ADSCs。如图 3.1.3 所示。
本文编号：3606627
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1人脂肪干细胞（ADSCs）镜下形态
图 3.1.2 ADSCs 成脂、成骨诱导培养后染色。A：ADSCs 成脂诱导培养 14 天后，油红 O 结果，镜下见橘红色脂肪滴（×40）；B：ADSCs 成骨诱导培养 21 后，茜素红染色结果，镜橘红色典型钙化结节（×200）3.1.3 ADSCs 流式细胞仪鉴定表面标记物通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原，结果示：所培养细胞的 CD73、CD90 表达
通过流式细胞仪鉴定细胞表面抗原，结果示：所培养细胞的 CD73、CD90 表达大于 95%， CD34、CD45 表达均小于 10%，因此表明该细胞 CD73、CD90 为阳性表达CD34、CD45 为阴性表达，符合参考文献所述 ADSCs 表面标记物的特征，可鉴定所养的细胞为 ADSCs。如图 3.1.3 所示。
本文编号：3606627
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