低表达的miR-138-5p对IL-1β诱导的软骨细胞ATDC5和CHON-001炎症的保护作用及机制研究
发布时间：2022-01-26 08:37
研究背景骨关节炎（osteoarthritis,OA）常见于老年人,通常临床上以关节软骨退化并伴随发生炎症为特征的慢性疾病。MicroRNAs被定义为单链非编码小分子RNA,其长度为18-24个碱基,大部分存在于基因间区域。越来越多的证据支持miRNAs对软骨细胞凋亡、软骨退化和关节炎的发病机制有着巨大的影响。目前研究已发现miR-138-5p参与软骨表型和成骨调节,可能是OA发生发展的重要因素。我们的此项研究旨在研究miR-138-5p与软骨细胞异常凋亡以及炎性因子分泌的关系。此外,考虑到软骨细胞凋亡与OA进展的密切关系,我们进一步研究miR-138-5p与OA发生发展的中的作用。研究目的本文希望通过对miR-138-5p在IL-1β诱导的软骨组织细胞CHON-001和ATDC 5中表达水平差异进行研究,进而对IL-1β诱导的人软骨细胞炎性损伤的机制作用进行研究,希望能够为OA提供新的治疗目标并提供研究材料。研究方法（1）首先用不同浓度IL-1β诱导ATDC5和CHON-001软骨细胞,检测对软骨细胞的增殖、迁移的影响,以及对相关炎症因子、凋亡蛋白的影响。（2）我们收集了 30例OA...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：105 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图３－１?ｍｉＲ－１３８－５ｐ在ＯＡ软骨中和模拟ＩＬ－ｌ?ｆＢ表达诱导的炎症损伤情况下，ｍｉＲ－１３８－５ｐ在??ＣＨＯＮ－００１和ＡＴＤＣ５细胞中下调
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【参考文献】：
期刊论文
[1]热敏灸在创伤性膝关节炎患者中运用对关节液及血清中MMP3、白细胞介素-6、白细胞介素-8水平的影响[J]. 盛有根,徐海波,方兴. 中国卫生检验杂志. 2018(13)
[2]聚合度7-15的壳寡糖抑制脂多糖刺激的单核细胞产生TNF-α和IL-8的作用研究[J]. 李昱,王文霞,许青松,李曙光,杜昱光. 天然产物研究与开发. 2014(01)
[3]三七总皂苷对MCAO大鼠脑组织中性粒细胞浸润及相关炎性因子的抑制作用[J]. 任周新,孙建宁,赵辉,钟静,王斌,张妍. 中成药. 2009(09)
[4]化脓性脑膜炎和病毒性脑炎患儿脑脊液中IL-6和TNF-α水平的变化及临床意义[J]. 张晓春,赵萍,郭秀东,高英. 宁夏医学杂志. 2005(12)
[5]血清白细胞介素-6和细胞黏附分子-1监测在肾移植急性排斥诊断中的意义[J]. 赵磊,周春燕,马潞林,陈忠新,郭应禄. 中华实验外科杂志. 2004(03)
[6]植物程序性细胞死亡检测技术[J]. 徐昌杰,陈昆松,Hong Ding,IonaE.Weir,IanB.Ferguson. 遗传. 2004(01)
[7]恶性肿瘤、创伤及炎症患者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R含量的比较[J]. 张喜平,李宗芳,程琪辉,曾小澜,刘效恭. 陕西医学杂志. 2002(01)
[8]IL-8单抗保护兔肝脏免受中性粒细胞介导的再灌注损伤[J]. 刘继明,朱兴国,朱华亭,张毅,李德春,康苏娅,张学光. 上海免疫学杂志. 2001(01)
硕士论文
[1]兔中性粒细胞防御素对A549细胞IL-8基因表达的影响[D]. 马懿.四川大学 2006
本文编号：3610182
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：105 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图３－１?ｍｉＲ－１３８－５ｐ在ＯＡ软骨中和模拟ＩＬ－ｌ?ｆＢ表达诱导的炎症损伤情况下，ｍｉＲ－１３８－５ｐ在??ＣＨＯＮ－００１和ＡＴＤＣ５细胞中下调
ｍｐａｎｙ）测定荧光素酶活性。??４．３．８统计方法??采用ＧｒａｐｈＰａｄ?Ｐｒｉｓｍ?６．０软件进行统计，数据采用单因素方差进行统计学分??析，Ｐ＜０．０５为统计学意义差异。??４．４实验结果??４．４．１?ｍｉＲ－１３８－５ｐ?能够靶向?ＳＯＸ９?基因??为了探索ｍｉＲ－１３８－５ｐ与ＳＯＸ９的关系，我们利用生物信息学方法预测了??ｍｉＲ－１３８－５ｐ的可能靶向，然后构建了?ＳＯＸ９?３’－ＵＴＲ－ｍｕｔ荧光素酶报告基因和??ＳＯＸ９?３’－ＵＴＲ－ｗｔ荧光素酶报告载体（见图４－１Ａ）。图４－２Ｂ所示，ＳＯＸ９??３’－ＵＴＲ－ｍｕｔ转染组的ＳＯＸ９表达无明显改变，而转染ＳＯＸ９?３’－ＵＴＲ－ｗｔ的细胞??组的ＳＯＸ９表达明显降低。这说明ＳＯＸ９是ｍｉＲ－１３８－５ｐ的靶向。??Ａ?ＳＯＸ＾ＵＴＲ－ｗｔ：?５＇?ＣＵＧＵＧＣＣＵＣＵＣＡＧＭＣＡＣＣＡＧＣＡ．?３＇?ＳＯＸ９－３＊ＵＴＲ－ｗｔ：?５＇．．?ＣＵＧＵＧＣＣＵＣＵＣＡＧＡＡＵＡＣＣＡＧＣＧ．．．３，??ｌｌｌｌｌｌｌ?ｌｌｌｌｌｌｌ??ｈｓａ－ｍｉＲ－１３８－５ｐ?３＊?ＧＣＣＧＧＡＣＵＡＡＧＵＧＵＵＧＵＧＧＵＣＧＡ?５＇?ｍｍｕ－ｍｉＲ－１３８－５ｐ?３＇?ＧＣＣＧＧＡＣＵＡＡＧＵＧＵＵＧＵＧＧＵＣＧＡ?５＇??Ｉ?ＩＩ?Ｉ?ＩＩ??ＳＯＸ９－３＊ＵＴＲ－ｍｕｔ?５＇?．．．ＣＵＧＵＧＣＣＵＣＵＣＡＧＭＧＡＧＧＡＧＧＡ．?．３＊?ＳＯＸＳ－＾ＵＴＲ－ｍｕｔ：?５＊．．?ＣＵＧＵＧＣＣＵＣＵＣＡＧＡＡＧＡＧＧＡＧＧＡ?．３＇??Ｂ?ＣＨＯＮ－００１??餐?■?ｍｉＲ－１３５－５ｐｍｉｍＪＣＳ?ＡＴＤＣ５?■?ｍｆＲ－１３８－５ｐｍｆｍ？
５?ｃｅｌｌｓ??ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｍｉＲ－１３８－５ｐ?ｍｉｍｉｃ．??４．４．３?ｓｉ－ＳＯＸ９抑制软骨细胞ＣＨＯＮ－ＯＯｌ和ＡＴＤＣ５的增殖??我们使用?ｓｉ－ｃｏｎｔｒｏｌ、ｓｉ－ＳＯＸ９、ｍｉＲ－１３８－５ｐ－ｉｎ?和?ｍｉＲ－１３８－５ｐ－ｉｎ／ｓｉ－ＳＯＸ９?转??染ＣＨＯＮ－ＯＯｌ和ＡＴＤＣ．?５细胞系，然后使用ＣＣＫ８检测细胞系的细胞活力。结??果发现，ｍｉＲ－１３８－５ｐ－ｉｎ转染的细胞具有最高的细胞活力，而ｓｉ－ＳＯＸ９则具有最??低的细胞活力（图４－３）。??ＣＨＯＮ－００１??１?Ｖ?＋?ＳｌＣｏ＿?｜?ＡＴＤＣ５?Ｔ?＋?ｓ？．Ｃ〇ｎｔｆ〇ｌ??ｇ?０?８－?ｉ?－＊？?ＳＩ－ＳＯＸ９?８?０１?？?ｓｉ－ＳＯＸ９??§０６－?＾?ｍｉＲ－１３８＇５ｐ－ｉｎ?ｇ〇６．?ｉ?－＊?ｍ．Ｒ－１３８－５ｐ－ｉｎ??；?ｍｉＲ－１３８－５ｐ－？ｎ／ｓｔ－ＳＯＸ９?；?Ｉ?ｍｉＲ－１３８－５ｐ－ｉｎ／ｓｉ－ＳＯＸ９??＾０．２－??〇?ｏ??°〇．〇－ｌ?．?．?．—?°〇．〇－ｌ?．?１?１—??０?２４?４８?７２?０?２４?４８?７２??Ｔｉｍｅ（ｈｏｕｒｓ）?Ｔｉｍｅ（?ｈｏｕｒｓ）??图４－３ｓｉ－ＳＯＸ９抑制软骨细胞系ＣＨＯＮ－ＯＯｌ和ＡＴＤＣ５增殖??用?ＣＣＫ－８?法检测?ｓｉ－ｃｏｎｔｒｏｌ、ｓｉ－ＳＯＸ９、ｍｉＲ－ｎ８＿５ｐ－ｉｎ?和?ｍｉＲ－１３８－５ｐ－ｉｎ／ｓｉ－ＳＯＸ９?对?ＣＨＯＮ－００１??和八丁００?５细胞增殖的影响。＊＊？＜０．０１。??Ｆｉｇｕｒｅ?４－３?Ｓｉ－ＳＯＸ９?ｉｎｈｉｂｉｔｓ
【参考文献】：
期刊论文
[1]热敏灸在创伤性膝关节炎患者中运用对关节液及血清中MMP3、白细胞介素-6、白细胞介素-8水平的影响[J]. 盛有根,徐海波,方兴. 中国卫生检验杂志. 2018(13)
[2]聚合度7-15的壳寡糖抑制脂多糖刺激的单核细胞产生TNF-α和IL-8的作用研究[J]. 李昱,王文霞,许青松,李曙光,杜昱光. 天然产物研究与开发. 2014(01)
[3]三七总皂苷对MCAO大鼠脑组织中性粒细胞浸润及相关炎性因子的抑制作用[J]. 任周新,孙建宁,赵辉,钟静,王斌,张妍. 中成药. 2009(09)
[4]化脓性脑膜炎和病毒性脑炎患儿脑脊液中IL-6和TNF-α水平的变化及临床意义[J]. 张晓春,赵萍,郭秀东,高英. 宁夏医学杂志. 2005(12)
[5]血清白细胞介素-6和细胞黏附分子-1监测在肾移植急性排斥诊断中的意义[J]. 赵磊,周春燕,马潞林,陈忠新,郭应禄. 中华实验外科杂志. 2004(03)
[6]植物程序性细胞死亡检测技术[J]. 徐昌杰,陈昆松,Hong Ding,IonaE.Weir,IanB.Ferguson. 遗传. 2004(01)
[7]恶性肿瘤、创伤及炎症患者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R含量的比较[J]. 张喜平,李宗芳,程琪辉,曾小澜,刘效恭. 陕西医学杂志. 2002(01)
[8]IL-8单抗保护兔肝脏免受中性粒细胞介导的再灌注损伤[J]. 刘继明,朱兴国,朱华亭,张毅,李德春,康苏娅,张学光. 上海免疫学杂志. 2001(01)
硕士论文
[1]兔中性粒细胞防御素对A549细胞IL-8基因表达的影响[D]. 马懿.四川大学 2006
本文编号：3610182
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