硫化氢对烧伤大鼠血清干预培养表皮细胞内质网应激的影响
发布时间：2022-01-26 07:33
目的探讨硫化氢对烧伤大鼠血清干预培养表皮细胞内质网应激的影响方法探究对象选取新生1天的乳大鼠背部表皮提取的表皮细胞。研究分组分为三组。选取健康SD大鼠（雌雄不分）52只,正常喂养至350-400g后禁食24小时,选取10只健康SD大鼠（雌雄不分）,于无菌条件下腹主动脉取血,选取离心提取的血清作为正常对照组备用;烧伤造模处理18h后的42只SD大鼠（雌雄不分）提取的血清作为烧伤实验组备用。烧伤实验组再分成两组,即烧伤对照组和烧伤干预组（外源性NaHS干预组）。在干预培养过程中,正常对照组与烧伤对照组分别制备成10%正常、10%烧伤大鼠血清培养基,烧伤干预组制备成10%烧伤大鼠血清培养基,并加入浓度为200μmol/L的NaHS。表皮细胞分别通过三组的培养基体外培养1h、6h、12h、24h。于细胞培养的1h、6h、12h后,采取RT-PCR检测表皮细胞中内质网应激的JNK、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、钙网蛋白（calreticulin,CRT）及caspase-12的mRNA相对表达水平,于细胞培养的24h后采用Western Blotting印迹法检测磷酸后JNK、GRP78、C...
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
熔解曲线
图 2.2 扩增曲线5.6 Western Blotting 法实验过程5.6.1 原理Western Blotting 技术是将提取的蛋白质样本，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳，Maker 电泳条带分子量的大小选择目的条带，转移到 PVDF 等载体上，利原抗体反应孵化目的蛋白的检测技术。5.6.2 实验步骤1)玻璃板准备：用水清洗玻璃板，双蒸水冲洗两遍，烘干机烘干。将烘干的玻璃板在架子上，注入双蒸水，5min 后观察是否漏水。
个实验组体外培养的表皮细胞裂解后提取g 印迹法检测，记录试验结果，通过软件计算3.2.1，图 3.2.1：表 3.2.1 不同实验组表皮细胞体外培养 24h 后灰CRT Caspase-12 JNK:上 组 0.50±0.03 1.06±0.51 1.18±0.19 组 0.58±0.05 2.01±0.45 1.50±0.22 组 0.46±0.08 1.27±0.22 0.75±0.31 5.53 7.29 11.70 <0.05 <0.05 <0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化氢对大鼠肠缺血∕再灌注损伤中肠黏膜上皮细胞凋亡的影响[J]. 朱仁武,顾叶春,张煜程,姜阳贵,戴雍月. 中华全科医学. 2016(08)
[2]硫化氢对深Ⅱ度烧伤大鼠创面巨噬细胞分泌细胞因子的影响[J]. 李毅,徐东波,王洪瑾. 中华烧伤杂志. 2016 (07)
[3]硫化氢对1型糖尿病大鼠肾脏的保护作用[J]. 杨锐,刘小粉,马善峰,高琴,李正红,贾强. 中国应用生理学杂志. 2016(02)
[4]硫化氢对常见心血管疾病的保护作用及其机制[J]. 钱玲玲,刘晓宇,王如兴. 临床心血管病杂志. 2015(10)
[5]硫化氢对尼古丁诱导的人支气管上皮细胞内质网应激及细胞凋亡的影响[J]. 林帆,陈亚红,廖程程,孙云,白宇,廖艺璇,李敏霞,齐永芬. 中华医学杂志. 2015 (28)
[6]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制研究进展[J]. 伍冬冬,潘频华,覃庆武. 中华结核和呼吸杂志. 2015 (07)
[7]硫化氢活化ERK抵抗内质网应激诱导的心肌细胞凋亡[J]. 祝晓莹,王桂美,胡敏,陆欢,邓晶,严晓红. 华中科技大学学报(医学版). 2015(03)
[8]硫化氢对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的调节[J]. 刘志伟,王海英,关岚,赵斌. 中华急诊医学杂志. 2014 (08)
[9]JNK信号通路与细胞凋亡[J]. 傅应亚,黎友伦. 重庆医科大学学报. 2014(03)
[10]内质网应激分子伴侣GRP78在大鼠缺血再灌注损伤肝脏中的表达[J]. 石印青,陈亮,任利,张洋,王海久,周瀛,侯立朝,樊海宁. 中国普通外科杂志. 2013(07)
博士论文
[1]硫化氢促进不同缺血模型的血管新生及其机制研究[D]. 李娜.复旦大学 2014
[2]钙网蛋白介导的内质网应激相关凋亡参与心肌细胞缺氧/复氧损伤[D]. 徐菲菲.中国人民解放军军医进修学院 2009
硕士论文
[1]硫化氢对烧伤大鼠体外培养皮肤巨噬细胞MAPK信号传导通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影响[D]. 李兴龙.青海大学 2017
[2]硫化氢改善慢性束缚应激诱导的小鼠海马神经元内质网应激[D]. 曾洋.南华大学 2015
[3]硫化氢拮抗糖尿病大鼠海马内质网应激和突触障碍并上调海马BDNF-TrkB通路[D]. 袁娟.南华大学 2015
[4]硫化氢抑制内质网应激改善大鼠主动脉血管钙化[D]. 杨锐.河北医科大学 2015
[5]钙网蛋白调控的Ca2+信号途径在应力介导成肌细胞凋亡中的作用及机制研究[D]. 贾萍萍.青岛大学 2013
[6]p38和JNK在缺氧诱导体外培养人视网膜色素上皮细胞凋亡中的作用[D]. 刘敏.第四军医大学 2008
本文编号：3610093
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
熔解曲线
图 2.2 扩增曲线5.6 Western Blotting 法实验过程5.6.1 原理Western Blotting 技术是将提取的蛋白质样本，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳，Maker 电泳条带分子量的大小选择目的条带，转移到 PVDF 等载体上，利原抗体反应孵化目的蛋白的检测技术。5.6.2 实验步骤1)玻璃板准备：用水清洗玻璃板，双蒸水冲洗两遍，烘干机烘干。将烘干的玻璃板在架子上，注入双蒸水，5min 后观察是否漏水。
个实验组体外培养的表皮细胞裂解后提取g 印迹法检测，记录试验结果，通过软件计算3.2.1，图 3.2.1：表 3.2.1 不同实验组表皮细胞体外培养 24h 后灰CRT Caspase-12 JNK:上 组 0.50±0.03 1.06±0.51 1.18±0.19 组 0.58±0.05 2.01±0.45 1.50±0.22 组 0.46±0.08 1.27±0.22 0.75±0.31 5.53 7.29 11.70 <0.05 <0.05 <0.05
【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化氢对大鼠肠缺血∕再灌注损伤中肠黏膜上皮细胞凋亡的影响[J]. 朱仁武,顾叶春,张煜程,姜阳贵,戴雍月. 中华全科医学. 2016(08)
[2]硫化氢对深Ⅱ度烧伤大鼠创面巨噬细胞分泌细胞因子的影响[J]. 李毅,徐东波,王洪瑾. 中华烧伤杂志. 2016 (07)
[3]硫化氢对1型糖尿病大鼠肾脏的保护作用[J]. 杨锐,刘小粉,马善峰,高琴,李正红,贾强. 中国应用生理学杂志. 2016(02)
[4]硫化氢对常见心血管疾病的保护作用及其机制[J]. 钱玲玲,刘晓宇,王如兴. 临床心血管病杂志. 2015(10)
[5]硫化氢对尼古丁诱导的人支气管上皮细胞内质网应激及细胞凋亡的影响[J]. 林帆,陈亚红,廖程程,孙云,白宇,廖艺璇,李敏霞,齐永芬. 中华医学杂志. 2015 (28)
[6]急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制研究进展[J]. 伍冬冬,潘频华,覃庆武. 中华结核和呼吸杂志. 2015 (07)
[7]硫化氢活化ERK抵抗内质网应激诱导的心肌细胞凋亡[J]. 祝晓莹,王桂美,胡敏,陆欢,邓晶,严晓红. 华中科技大学学报(医学版). 2015(03)
[8]硫化氢对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞内质网应激的调节[J]. 刘志伟,王海英,关岚,赵斌. 中华急诊医学杂志. 2014 (08)
[9]JNK信号通路与细胞凋亡[J]. 傅应亚,黎友伦. 重庆医科大学学报. 2014(03)
[10]内质网应激分子伴侣GRP78在大鼠缺血再灌注损伤肝脏中的表达[J]. 石印青,陈亮,任利,张洋,王海久,周瀛,侯立朝,樊海宁. 中国普通外科杂志. 2013(07)
博士论文
[1]硫化氢促进不同缺血模型的血管新生及其机制研究[D]. 李娜.复旦大学 2014
[2]钙网蛋白介导的内质网应激相关凋亡参与心肌细胞缺氧/复氧损伤[D]. 徐菲菲.中国人民解放军军医进修学院 2009
硕士论文
[1]硫化氢对烧伤大鼠体外培养皮肤巨噬细胞MAPK信号传导通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影响[D]. 李兴龙.青海大学 2017
[2]硫化氢改善慢性束缚应激诱导的小鼠海马神经元内质网应激[D]. 曾洋.南华大学 2015
[3]硫化氢拮抗糖尿病大鼠海马内质网应激和突触障碍并上调海马BDNF-TrkB通路[D]. 袁娟.南华大学 2015
[4]硫化氢抑制内质网应激改善大鼠主动脉血管钙化[D]. 杨锐.河北医科大学 2015
[5]钙网蛋白调控的Ca2+信号途径在应力介导成肌细胞凋亡中的作用及机制研究[D]. 贾萍萍.青岛大学 2013
[6]p38和JNK在缺氧诱导体外培养人视网膜色素上皮细胞凋亡中的作用[D]. 刘敏.第四军医大学 2008
本文编号：3610093
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