LncRNA在骨肉瘤中的表达及作用机制研究

发布时间：2022-02-13 22:16

　　目的:已发现长链非编码RNA（LncRNA）SNHG5、Gclnc1在肿瘤中起重要作用。然而,lncRNA SNHG5和Gclnc1在骨肉瘤中的作用和机制尚不清楚。本研究的目的是探讨SNHG5与Gclnc1在骨肉瘤中的具体功能及调控机制方法:通过对于在线数据库GEO的骨肉瘤的芯片进行生信分析,预测lncRNA SNHG5在骨肉瘤中的表达与预后情况。收集骨肉瘤组织标本20例,采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测lncRNA Gclnc1在骨肉瘤标本的表达情况。选取143B、MG63（基因敲低）和U2OS、U2R（过表达）细胞株进行SNHG5的功能研究。选取MG63（基因敲低）和U2OS（过表达）细胞株进行Gclnc1的功能研究。在对SNHG5进行敲低和过表达后,通过MTT法、克隆形成实验、流式细胞仪、Transwell实验、细胞划痕实验探讨SNHG5、miR-212-3p和SGK3对骨肉瘤细胞生长的影响。RT-PCR、蛋白免疫印迹法（Western blot）分析和荧光素酶报告实验等方法检测lncRNA SNHG5与miR-212-3p之间的相互作用。在对Gclnc1进行敲低和... 

【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

生信分析显示lncRNASNHG5在骨肉瘤细胞中高表达且与预后相关

第3章结果12图2SNHG5通过调控caspase的关键蛋白调控细胞凋亡*p<0.053.3SNHG5通过EMT过程调节骨肉瘤细胞的迁移和侵袭为了研究SNHG5在细胞转移过程中的作用，并探讨SNHG5与EMT进展的关系，我们进行了Transwell试验、细胞划痕试验。Transwell试验和伤口愈合试验的结果显示，SNHG5的敲低显著减少了143B细胞的迁移和侵袭(图3A-B)。相反，SNHG5的过表达大大促进了U2OS细胞的迁移和侵袭(图3A-B)。我们接下来检测了EMT相关标记物在我们的研究中是否发生了改变。结果显示，与对照组相比，沉默SNHG5后，N-cadherin,Vimentin,andβ-catenin的蛋白表达显著降低，而E-cadherin的蛋白表达显著增加(图3C)。而在U2OS细胞过表达SNHG5后产生相反作用(图3C)。此外，与EMT标记物一样，转录因子Twist和ZEB1的mRNA表达与SNHG5平行变化(图3D)，这表明lncRNASNHG5参与了骨肉瘤细胞的EMT进程。

SNHG5调控骨肉瘤细胞的转移*p<0.05

【参考文献】：
期刊论文
[1]Mesenchymal stem cells: Molecular characteristics and clinical applications[J]. Farbod Rastegar,Deana Shenaq,Eric R Wagner,Stephanie H Kim,Russell R Reid,Hue H Luu,Rex C Haydon.  World Journal of Stem Cells. 2010(04)



本文编号：3624019