Omi/HtrA2对小鼠骨骼肌线粒体通路相关基因表达的影响

发布时间：2022-02-14 09:58

　　骨骼肌萎缩主要表现为肌纤维进行性缩小甚至消失,肌肉质量和容积变小。引起肌肉萎缩的原因复杂,包括蛋白质合成与降解失调、慢性炎症反应、氧化应激等多方面原因。肌细胞中线粒体含量丰富,承担着调节肌肉细胞的能量供应、活性氧（ROS）稳态、细胞信号传导等多种使命。已经发现,老年大鼠骨骼肌中的亚肌膜下（SS）、肌原纤维间（IMF）线粒体数量都趋于减少。因此,在骨骼肌衰老过程中线粒体功能的作用引起了人们的关注。MuRF1（Trim63）和MAFbx（atrogin-1）是两种重要的骨骼肌特异性E3连接酶,被认为是骨骼肌萎缩的标志物。骨骼肌萎缩时,MuRF1和MAFbx显著激活,促进底物蛋白的泛素化,从而使更多蛋白被转运到蛋白酶体中降解。当被抑制时可以减轻肌肉丢失,因此,二者的表达被认为可能与肌肉萎缩程度呈正相关。Omi/HtrA2是线粒体膜间隙上的一种丝氨酸蛋白酶,也是一种具有热休克蛋白性质的分子伴侣,其在线粒体质量控制和维持线粒体内稳态中起到重要的作用。Omi/HtrA2基因纯合子缺失鼠（-/-）(又被称之为HtrA2^mnd2小鼠)是利用基因敲除技术错义突变Omi/HtrA2基... 

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HtrA2mnd2小鼠骨骼肌HE染色（纵向切面）

Omi/HtrA2 基因杂合子小鼠（+/-）34.34 34.54 34.74 34.54 23.27 0.14HtrA2mnd2小鼠（-/-）29.67 29.80 30.59 30.02 21.88 1.23表 3.2 实时定量 PCR 测定 MuRF1 基因扩增 Ct 值目的基因 Ct 值 内参基因 基因表达差异Ct-1 Ct-2 Ct-3 Ct 平均值18s RNACt 平均值2-ΔΔCt野生型小鼠（+/+）33.38 36.64 35.02 35.01 25.77 1Omi/HtrA2 基因杂合子小鼠（+/-）38.77 38.75 38.79 38.77 23.27 0.01HtrA2mnd2小鼠（-/-）30.58 30.03 30.29 30.30 21.88 1.77A B

图 3.3 HtrA2mnd2小鼠骨骼肌线粒体细胞周期相关基因表达A：骨骼肌中 Asns 表达变化 B：骨骼肌中 Trib3 表达变化（*P<0.05，**P<0.01）3.4 HtrA2mnd2小鼠骨骼肌线粒体生物合成基因PGC-1α的表达水平实时定量 PCR 方法检测小鼠骨骼肌的线粒体生物合成相关基因的表达变化。结果表明：与野生型小鼠（+/+）相比，HtrA2mnd2小鼠（-/-）和 Omi/HtrA2基因杂合子小鼠（+/-）的骨骼肌组织中线粒体生物合成基因 PGC-1α的 mRNA水平均降低。（表 3.5，图 3.4）这提示 Omi/HtrA2 缺失引起小鼠骨骼肌组织中的线粒体数目减少。表 3.5 实时定量 PCR 测定 PGC-1α 基因扩增 Ct 值目的基因 Ct 值 内参基因 基因表达差异Ct-1 Ct-2 Ct-3 Ct平均值18s RNA2-ΔΔCt


本文编号：3624342