剖析TNF-α诱导牙髓干细胞成骨分化期间IncRNA的改变

发布时间：2022-07-29 19:10

　　目的 牙髓干细胞（dental pulp stem cells,DPSCs）是目前国内外研究骨组织工程的理想细胞,究其原因是细胞来源容易获得,且功能多元化,近年来其研究成果不断取得突破。研究表明,长链非编码RNA（IncRNA）在间充质干细胞成骨分化过程中起着相当重要的作用。然而,IncRNA是否参与DPSCs的成骨分化尚不清楚。本研究旨在检测IncRNA是否参与DPSCs成骨分化过程。通过RNA测序（RNA-Seq）逆转录-定量聚合酶链反应（RT-qPCR）及分析验证,确定成骨分化不同阶段中的IncRNA表达的不同变化。结果1.TNF-α促进DPSC的成骨分化:在第7天和14天时,分别在培养牙髓干细胞的培养基中加10 ng/mL TNF-α。在第7天,用TNF-α刺激后,ALP染色显示其在成骨分化过程中强阳性表达,表明DPSCs正在进行成骨分化。而在细胞培养第14天时用TNF-α干预,ALP染色显示阳性表达增加至85-90%。这些结果表明,在牙髓干细胞分化过程中,经TNF-α诱导情况下,促进DPSC的成骨分化。2.成骨分化过程中基因表达变化:为了进一步验证牙髓干细胞成骨分化基因表达的... 

【文章页数】：65 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 课题研究的目的和意义
    1.2 国内外研究概况
        1.2.1 牙髓干细胞(DPSCs)
        1.2.2 牙髓干细胞分化过程中的信号通路
        1.2.3 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)
        1.2.4 牙髓干细胞与lncRNA的相关性
        1.2.5 总结
    1.3 论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
    2.1 研究资料及仪器设备
        2.1.1 组织标本
        2.1.2 牙髓干细胞培养
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验仪器及耗材
    2.2 实验流程与方法
        2.2.1 成骨细胞分化模型、碱性磷酸酶(ALP)染色
        2.2.2 RNA提取,RNA-seq和生物信息学分析
        2.2.3 RT-qPCR
        2.2.4 细胞转染
        2.2.5 统计学处理
第三章 结果
    3.1 TNF-A促进DPSC的成骨分化
    3.2 成骨分化过程中基因表达变化
    3.3 在DPSCs成骨分化过程中的INCRNA表达的变化
    3.4 LNCRNA和MRNA在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的差异表达
    3.5 INCRNA差异表达的分析
    3.6 由TNF-α诱导的高效的成骨分化需要LNcRNA XIST
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
英文缩写词表
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3667019