ClC-3在17β-雌二醇对SNI模型鼠疼痛影响中的作用机制研究

发布时间：2022-08-11 13:27

　　目的:该研究旨在探讨电压门控氯通道-3（voltage-gated chloride channel-3,ClC-3）是否在17β-雌二醇（17β-Estradiol,E₂）对卵巢切除（OVX）大鼠坐骨神经损伤（SNI）诱导的神经病理性疼痛的影响中发挥作用,阐明17β-雌二醇调控去势雌鼠神经病理性疼痛可能的机制。方法:此项研究选用研究对象为雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠。大鼠双侧去卵巢术2周后,再对大鼠行神经病理性疼痛模型（坐骨神经分支选择性损伤模型,Spared Nerve Injury,SNI）手术。雌性SD大鼠随机分组为去卵巢（OVX）组,OVX+SNI组,OVX+SNI+E₂组,OVX+SNI+E₂+DMSO（溶剂,dimethyl sulfoxid,二甲基亚砜）组,OVX+SNI+E₂+Cltx（ClC-3特异性阻断剂,Chlorotoxin）组。OVX+SNI+E₂大鼠在OVX两周后每天一次皮下注射（s.c.）17β-雌二醇（30μg/kg/day）,... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略词对照表
前言
材料与方法
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 主要实验试剂的配制方法
        1.4 主要实验仪器和软件
    2 方法
        2.1 实验分组情况
        2.2 动物模型的制备
        2.3 行为学测试
        2.4 鞘内置管及阻断剂注射给药方法
        2.5 雌激素替代给药与血清雌激素浓度测量的方法
        2.6 DRG组织的准备
        2.7 免疫荧光实验
        2.8 免疫印迹实验(Western- blot)
        2.9 实时定量聚合酶链反应试验(qRT-PCR)
        2.10 背根神经节神经元胞体的分离与消化
        2.11 全细胞膜片钳技术记录大鼠DRG神经元电生理特性
        2.12 统计学分析
结果
    1 去卵巢2 周后的大鼠行为学没有改变、ClC-3 的表达没有变化
    2 ClC-3 主要表达于OVX大鼠的中/小型DRG神经元
    3 OVX大鼠SNI后 DRG神经元ClC-3 表达下调
    4 17β-雌二醇给药可减轻SNI后 OVX大鼠的冷痛觉过敏
    5 17β-雌二醇给药后ClC-3 蛋白和m RNA表达的恢复
    6 鞘内注射Cltx可以抑制17β-雌二醇对Cl C-3 蛋白的上调作用,并加剧痛觉过敏,但不影响ClC-3 mRNA的增加
    7 在OVX和 OVX+ SNI大鼠中鞘内注射Cltx会增加痛觉过敏和下调ClC-3 蛋白表达
    8 17β-雌二醇可降低OVX大鼠SNI引起的DRG神经元兴奋性,但被Cltx阻断
讨论
结论与展望
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简介
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
[1]GPER agonist G1 suppresses neuronal apoptosis mediated by endoplasmic reticulum stress after cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Zi-Wei Han,Yue-Chen Chang,Ying Zhou,Hang Zhang,Long Chen,Yang Zhang,Jun-Qiang Si,Li Li.  Neural Regeneration Research. 2019(07)
[2]Mechanism of persistent hyperalgesia in neuropathic pain caused by chronic constriction injury[J]. Qin-Yi Chen,Chao-Yang Tan,Yang Wang,Ke-Tao Ma,Li Li,Jun-Qiang Si.  Neural Regeneration Research. 2019(06)
[3]TRPV1 may increase the effectiveness of estrogen therapy on neuroprotection and neuroregeneration[J]. Ricardo Ramírez-Barrantes,Ivanny Marchant,Pablo Olivero.  Neural Regeneration Research. 2016(08)
[4]Modulatory effect of substance P on GABA-activated currents from rat dorsal root ganglion[J]. Jun-qiang SI2, Zhi-qin ZHANG, Chun-xia LI, Li-feng WANG, Yun-lei YANG3, Zhi-wang LI3Department of Physiology, Medical College Shihezi University, Shihezi 832002, China3 Now in Tongji Medical College, Huazhong University of Sci-ence and Technology, Wuhan 430030, China..  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(05)



本文编号：3674742