慢病毒介导PPAR-γ基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭性的影响
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【摘要】:目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)基因对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KF)增殖、迁移、侵袭性的影响。方法:体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,构建慢病毒载体,将携带PPAR-γ及绿色荧光蛋白的慢病毒载体(LV-PPAR-γ-GFP,KF-PPAR-γ组)及空载体(LV-GFP,KF-NC组)感染KF细胞,并设空白对照组(KF组),行干预后进行如下实验:1.应用实时定量PCR和Western blot分别检测PPAR-γm RNA及蛋白的表达。2.MTT比色法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖情况。3.划痕实验和Trans-well小室实验检测KF细胞的体外迁移和侵袭能力。结果:1.PPAR-γ慢病毒载体感染KF细胞96 h后,KF-PPAR-γ组PPAR-γm RNA和蛋白的表达量明显高于KF-NC组和KF组,差异有统计学意义(P0.05)。2.MTT结果显示,KF-PPAR-γ组吸光度A值明显降低,与KF-NC组和KF组比较,差异有统计学意义(P0.05)。3.划痕实验和Trans-well实验结果显示,PPAR-γ慢病毒载体能够抑制KF细胞的体外迁移和侵袭能力结论:1.过表达PPAR-γ基因能够抑制KF细胞增殖、迁移及侵袭能力。2.靶向提高瘢痕疙瘩中PPAR-γ的含量与活性,可能为瘢痕疙瘩的预防与治疗提供有效途径。
【关键词】:过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 增殖 迁移 侵袭
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R622
【目录】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 常用缩写词中英文对照表9-10
- 前言10-11
- 1 材料与方法11-22
- 1.1 研究材料11-15
- 1.2 研究方法15-21
- 1.3 统计学处理21-22
- 2 结果22-28
- 2.1 KF细胞的一般形态及特征22
- 2.2 慢病毒感染KF细胞22-23
- 2.3 慢病毒感染KF细胞后PPAR-γ mRNA和蛋白表达23-25
- 2.4 慢病毒感染KF细胞后MTT实验检测细胞增殖25
- 2.5 慢病毒感染KF细胞后细胞迁移运动能力的影响25-27
- 2.6 慢病毒感染KF细胞后细胞侵袭能力的影响27-28
- 3 讨论28-30
- 4 结论30-31
- 参考文献31-33
- 综述33-40
- 参考文献37-40
- 致谢40-41
- 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果41-43
- 个人简历43
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