Runx2基因转染骨髓间充质干细胞对修复膝关节软骨损伤的实验研究
发布时间:2022-10-30 11:30
目的:构建新西兰大耳兔膝关节软骨损伤模型,通过观察不同干预情况下兔膝关节软骨损伤的修复水平,探索Runx2基因转染骨髓间充质干细胞是否可以促进膝关节软骨损伤的修复,以期为广大膝关节软骨损伤患者提供更有效的临床治疗方案。方法:新西兰大耳兔20只,雄性,体重约2.5~2.7kg。适应性喂养一周后进行膝关节软骨损伤造模手术,造模成功后随机分为4组,每组5只,分别为A:空白对照组、B:透明质酸钠组、C:单纯骨髓间充质干细胞组、D:Runx2转染骨髓间充质干细胞组,分别于第4、8周进行膝关节取材,取材后对各组标本进行软骨组织修复肉眼观察;通过RT-PCR实验检测各组损伤部位修复物中Ⅱ型胶原(ColII)、蛋白聚糖(Agg)、Ⅹ型胶原(Col-x)、Ⅰ型胶原(Col-I)及Runx2的m RNA表达量;通过Western Blot实验分别检测各组的II型胶原蛋白表达量;对各组标本软骨切片分别进行HE染色、Masson染色,分析各组修复物性质和修复机制。结果:1、膝关节软骨损伤造模成功后,各实验组软骨缺损部分都得到不同程度的修复,通过组织学肉眼观察发现,干预4周后,与空白对照组相比,透明质酸钠组损伤...
【文章页数】:38 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
Abbreviation Inde
摘要
Abstract
第一章 导言
第二章 文献综述
2.1 软骨缺损概述
2.1.1 软骨缺损的病理表现
2.1.2 软骨损伤的治疗方法
2.2 Runx2基因研究进展
2.3 Runx2基因在软骨损伤修复的作用
2.4 小结与探讨
第三章 实验材料及方法
3.1 实验整体技术路线图
3.2 主要实验仪器和试剂
3.3 实验对象
3.4 模型建立
3.4.1 骨髓间充质干细胞培养
3.4.2 细胞转染
3.4.3 膝关节软骨损伤模型建立
3.5 实验分组
3.6 取材及检测指标
3.7 数据处理方法
第四章 实验结果
4.1 软骨损伤修复肉眼观
4.2 RT-PCRmRNA表达情况
4.3 相关蛋白的表达情况
4.4 组织病理学表现
4.4.1 苏木精—伊红染色
4.4.2 Masson染色
第五章 分析与讨论
5.1 软骨的自我修复能力
5.2 Runx2转染组与骨髓间充质干细胞组的对比
5.3 Runx2转染组与透明质酸钠组的对比
5.4 各组修复物组成成分构成
5.5 展望
第六章 结论
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]老年骨质疏松患者股骨Runt相关转录因子2水平与骨密度的关系[J]. 解光越,侯晓华,张志勇,高雯. 中国老年学杂志. 2016(08)
[2]淫羊藿对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Cbfa1和Osterix表达的影响[J]. 高建清,庄素新,黄小敬,袁健东,林垂聪,陈雷. 中华中医药学刊. 2016(02)
[3]补肾活血汤治疗老年桡骨远端骨折的临床疗效观察[J]. 黄永铨,罗毅文,王斌,胡年宏,张迅超,陈东风,侯秋科,徐志明,刘亚梅. 中国中医骨伤科杂志. 2015(03)
[4]补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响[J]. 闵文,黄桂成,华永庆,黄正泉. 中国实验方剂学杂志. 2013(15)
[5]自体软骨细胞修复关节软骨缺损的机制探讨[J]. 余方圆,卢世璧,黄利虹,许文静,彭江,赵斌,袁玫,黄靖香. 中国骨伤. 2010(09)
[6]软骨组织工程中相关生长因子理论研究的最新资讯[J]. 李成,王伟. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(28)
本文编号:3698808
【文章页数】:38 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
Abbreviation Inde
摘要
Abstract
第一章 导言
第二章 文献综述
2.1 软骨缺损概述
2.1.1 软骨缺损的病理表现
2.1.2 软骨损伤的治疗方法
2.2 Runx2基因研究进展
2.3 Runx2基因在软骨损伤修复的作用
2.4 小结与探讨
第三章 实验材料及方法
3.1 实验整体技术路线图
3.2 主要实验仪器和试剂
3.3 实验对象
3.4 模型建立
3.4.1 骨髓间充质干细胞培养
3.4.2 细胞转染
3.4.3 膝关节软骨损伤模型建立
3.5 实验分组
3.6 取材及检测指标
3.7 数据处理方法
第四章 实验结果
4.1 软骨损伤修复肉眼观
4.2 RT-PCRmRNA表达情况
4.3 相关蛋白的表达情况
4.4 组织病理学表现
4.4.1 苏木精—伊红染色
4.4.2 Masson染色
第五章 分析与讨论
5.1 软骨的自我修复能力
5.2 Runx2转染组与骨髓间充质干细胞组的对比
5.3 Runx2转染组与透明质酸钠组的对比
5.4 各组修复物组成成分构成
5.5 展望
第六章 结论
参考文献
致谢
【参考文献】:
期刊论文
[1]老年骨质疏松患者股骨Runt相关转录因子2水平与骨密度的关系[J]. 解光越,侯晓华,张志勇,高雯. 中国老年学杂志. 2016(08)
[2]淫羊藿对大鼠骨量及骨髓基质干细胞增殖、分化过程中Cbfa1和Osterix表达的影响[J]. 高建清,庄素新,黄小敬,袁健东,林垂聪,陈雷. 中华中医药学刊. 2016(02)
[3]补肾活血汤治疗老年桡骨远端骨折的临床疗效观察[J]. 黄永铨,罗毅文,王斌,胡年宏,张迅超,陈东风,侯秋科,徐志明,刘亚梅. 中国中医骨伤科杂志. 2015(03)
[4]补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响[J]. 闵文,黄桂成,华永庆,黄正泉. 中国实验方剂学杂志. 2013(15)
[5]自体软骨细胞修复关节软骨缺损的机制探讨[J]. 余方圆,卢世璧,黄利虹,许文静,彭江,赵斌,袁玫,黄靖香. 中国骨伤. 2010(09)
[6]软骨组织工程中相关生长因子理论研究的最新资讯[J]. 李成,王伟. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(28)
本文编号:3698808
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