从全基因组水平鉴定并阐述非编码RNA调控成骨分化与骨肿瘤发生的机制

发布时间：2022-12-23 23:30

　　研究背景/目的:骨肿瘤的发生与干细胞的增殖与分化失衡有关,但其机制尚未阐明。随着人类基因组计划的完成,非编码RNA对疾病发生的调控作用越来越受到关注,但其机制尚不清楚。基于此,我们自主研发并构建了具有19个随机碱基的RNA文库,用于筛选并鉴定调控干细胞增殖与分化失衡的非编码RNA,并研究相应非编码RNA的具体调控机制,最终为治疗骨肿瘤提供理论和实验基础。方法:（1）将具有19个碱基的RNA文库（n19 RNA library）通过逆转录病毒系统导入鼠胚胎成纤维细胞（i MEFs）中得到i MEFn19细胞,以BMP9诱导干细胞分化为模型,在体外用BMP9诱导i MEFn19分化,并裸鼠皮下注射异位成骨,3-4周后收取异位成骨包块,提取可贴壁生长的细胞,命名为i MEFOR1A（Osteogenic Resistance,OR）细胞,通过体外扩增,继续用BMP9诱导其分化并皮下注射,再提取可贴壁细胞,体内外扩增和筛选4次,分别命名为i MEFOR1A,i MEFOR1B,i MEFOR1C和i MEFOR1D,以仅导入n19 RNA文库而未经筛选的细胞（i MEFn19）作为对照。（2）... 

【文章页数】：175 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英汉缩略语名词对照
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分：从全基因组水平鉴定并阐述非编码RNA调控成骨分化与骨肿瘤发生的机制
    前言
    第一节 运用RNA文库筛选抗成骨分化细胞
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 实验小结
    第二节 抗成骨分化细胞的成骨分化能力鉴定
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 实验小结
    第三节 抗成骨分化细胞基因组DNA测序及单片段鉴定
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 实验小结
    第四节 DON对BMP9诱导成骨分化的影响
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 实验小结
    第五节 抗成骨分化细胞出现的机制探讨
        1 实验材料
        2 实验方法
        3 实验结果
        4 实验小结
    讨论
第二部分：LncRNA H19通过Notch信号通路调控BMP9诱导的干细胞成骨分化
    前言
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
第三部分：Notch信号通路通过促进成骨-成血管偶联机制增强BMP9诱导干细胞成骨分化
    前言
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
博士期间的主要学术成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Large Noncoding RNAs Are Promising Regulators in Embryonic Stem Cells[J]. Ya-Pu Li,Yangming Wang.  Journal of Genetics and Genomics. 2015(03)



本文编号：3725614