A型肉毒素重链对大鼠脊髓损伤后局部蛋白组学及生长相关蛋白表达的影响

发布时间：2023-04-05 00:19

　　目的:1.建立大鼠脊髓半横断损伤模型2.探讨Bo NT/A HC对大鼠脊髓损伤后局部蛋白组学的干预作用3.探讨Bo NT/A HC对大鼠脊髓损伤后选择性生长相关蛋白表达的影响4.探讨Bo NT/A HC对脊髓损伤后神经突起生长的作用5.探讨Bo NT/A HC对脊髓损伤后后肢功能的影响方法:1.在显微镜下用眼科精细镊以脊髓正中静脉为界限,横向夹断左侧脊髓复制大鼠脊髓半横断损伤模型,同时在损伤即刻局部注射和依据实验不同时间点每周经皮鞘内注射给与Bo NT/A HC治疗;2.取正常腰膨大处脊髓组织和单纯脊髓损伤2天组和Bo NT/A HC治疗2天组中损伤一侧局部1cm脊髓组织进行双向电泳(2-DE)和银染色确定Bo NT/A HC对脊髓损伤后局部蛋白表达的影响;3.取正常腰膨大处脊髓组织和单纯脊髓损伤2天组和Bo NT/A HC治疗2天组中损伤一侧局部1cm脊髓组织利用同位素标记的相对和绝对定量(i TRAQ)技术和液相色谱联合串联质谱(LC-MS/MS)检测各组中差异表达蛋白,同时对所鉴定的差异表达蛋白进行生物信息分析;4.基于以上蛋白组学技术分析,通过蛋白印记技术对实验不同时间点(正常...

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【学位级别】：硕士

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前言
第一部分 大鼠腰部脊髓半横断损伤模型的制备及BoNT/AHC的在体干预方法
    1 材料与方法
        1.1 实验动物与药物
        1.2 实验溶液
        1.3 实验器械
        1.4 实验仪器
        1.5 实验方法
    2 结果
        2.1 大鼠腰段脊髓半横断损伤模型的脊髓大体观察
        2.2 一般情况及步态特征
        2.3 损伤侧后肢运动和感觉功能的变化
第二部分 BoNT/AHC 对脊髓损伤后局部蛋白组学的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验动物与药物
        1.2 实验试剂
        1.3 实验溶液
        1.4 实验仪器
        1.5 实验方法
    2 结果
        2.1 双向电泳和银染色确定的BoNT/AHC对脊髓损伤后局部蛋白表达的影响
        2.2 iTRAQ技术分析中差异表达蛋白的确定和定量结果
        2.3 基于iTRAQ检测的差异表达蛋白GO归类分析结果
        2.4 基于 iTRAQ 检测的差异表达蛋白的基因组 KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析
        2.5 基于iTRAQ检测的差异表达蛋白的表达模式聚类分析
第三部分 BoNT/AHC对脊髓损伤后选择性生长相关蛋白(GAP-43和SCG10)表达的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验试剂
        1.2 实验溶液
        1.3 实验仪器
        1.4 实验方法
    2 结果
        2.1 BoNT/AHC促进脊髓损伤后p-GAP43和SCG10的表达
        2.2 p-GAP43和SCG10在脊髓损伤局部的分布特征
第四部分 BoNT/AHC对脊髓损伤后神经突起生长的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验仪器
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 BoNT/AHC可促进脊髓损伤灶周边神经突起增长
第五部分 BoNT/AHC对脊髓损伤后后肢运动和感觉功能恢复的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验仪器
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 BoNT/AHC可有限度地促进脊髓损伤后后肢运动功能的恢复
        2.2 BoNT/AHC对脊髓损伤侧感觉功能无明显效果
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历



本文编号：3782342