Semaphorin4D对斑马鱼脊髓损伤后修复的影响

发布时间：2023-04-16 18:16

　　Semaphorins家族成员参与了轴突发育过程中的轴突导向。Semaphorin4D(Sema4D)已被证实具有促进神经再生和抑制神经再生的双重作用。在轴突的发育过程中,它既可以促进轴突的生长,也可以促进生长锥的塌陷。因此,Sema4D可能在创伤性神经损伤的修复中起到了关键性作用。本学位论文中,主要探索了Sema4D在成年斑马鱼脊髓损伤修复模型中的神经保护作用以及机制。实时荧光定量PCR和原位杂交的结果显示,与假手术组相比,Sema4D mRNA在斑马鱼脊髓损伤后的急性期(脊髓损伤后72小时)升高表达;而在脊髓损伤后的修复期(脊髓损伤后11至21天),它的表达水平逐渐降低。Sema4D和Islet-1(运动神经元的标记物)或Iba-1(小胶质细胞的标记物)的免疫共标结果显示,在脊髓损伤后4小时和12小时,沿中央管分布的Sema4D阳性运动神经元被小胶质细胞包绕。之后本课题对脊髓横断的斑马鱼进行Sema4D morpholino给药以抑制其蛋白表达,顺行和逆行神经示踪实验结果显示,Sema4D参与了斑马鱼脊髓损伤后的轴突再生。游泳追踪实验结果显示,抑制Sema4D表达可阻碍斑马鱼脊髓损...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要实验仪器
        2.1.3 主要试剂
        2.1.4 主要试剂配制
    2.2 方法
        2.2.1 斑马鱼脊髓损伤模型构建
        2.2.2 荧光定量PCR
        2.2.3 探针制备
        2.2.4 原位杂交
        2.2.5 Morpholino实验
        2.2.6 免疫荧光
        2.2.7 正向神经示踪
        2.2.8 逆向神经示踪
        2.2.9 行为学测试
        2.2.10 统计学方法
第三章 结果
    3.1 脊髓损伤引起Sema4D mRNA表达地迅速感应
    3.2 Sema4D表达集中在脊髓中央管处
    3.3 脊髓损伤后Sema4D沿中央管和运动神经元发生共定位
    3.4 在脊髓损伤后的急性反应阶段，Sema4D和小胶质细胞的激活密切相关
    3.5 下调Sema4D的表达抑制了斑马鱼脊髓损伤后轴突的再生
    3.6 抑制Sema4D的表达阻碍了斑马鱼脊髓损伤后运动能力的恢复
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
发表论文情况
致谢
个人简历



本文编号：3791609