脊髓损伤后长链非编码RNA表达变化及其对神经元突起生长的调控作用

发布时间：2023-04-23 12:14

　　【目的】脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是指由于外力作用于脊柱并导致相应脊髓压迫或断裂,进而造成传导通路中断以及对应节段感觉运动功能的障碍。脊髓损伤作为一种严重的致残性中枢神经系统损伤,其会严重降低患者的生活质量并增加患者生活与经济上的负担。近些年来,国内外脊髓损伤发病率呈逐年上升趋势,然而由于脊髓损伤的病理分子机制极其复杂,因此临床上对脊髓损伤修复缺少行之有效的方法。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是具有调控基因表达作用的以一种非编码RNA。近些年来关于长链非编码RNA的相关研究越来越多,且其在脊髓损伤病理变化中的作用也亟待阐明。本研究拟通过应用microarray芯片——高通量组学方法对大鼠脊髓损伤后不同时间点的信使RNA(messenger RNA,mRNA)和lncRNAs表达情况进行检测,并通过生物信息学分析得到可能参与脊髓损伤后关键生物学过程的差异表达mRNA及lncRNA。此外本研究拟进一步验证并阐明关键lncRNA的功能,为脊髓损伤提供新的潜在治疗靶点。【方法】本课题首先制备大鼠脊髓挫伤模型,应用micro...

【文章页数】：125 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、脊髓损伤后mRNA的表达谱分析
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验材料与器械
        1.1.2 大鼠脊髓挫伤模型制备
        1.1.3 芯片检测
        1.1.4 生物信息学分析
        1.1.5 统计学分析
    1.2 结果
        1.2.1 大鼠脊髓挫伤模型制备
        1.2.2 样本RNA质检
        1.2.3 生物信息学分析
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、脊髓损伤后lncRNA的表达谱分析
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验材料与器械
        2.1.2 大鼠脊髓挫伤模型制备
        2.1.3 芯片检测
        2.1.4 生物信息学分析
        2.1.5 统计学分析
    2.2 结果
        2.2.1 样本聚类及相关性分析
        2.2.2 差异lncRNAs的筛选
        2.2.3 差异lncRNAs的功能分析
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、NONRATT006058 调控Brca1 抑制神经元突起生长的研究
    3.1 对象和方法
        3.1.1 实验材料与器械
        3.1.2 qRT-PCR验证关键mRNA及 lncRNA
        3.1.3 大鼠脊髓神经元原代培养
        3.1.4 荧光原位杂交明确NONRATT006058 在神经元内定位
        3.1.5 慢病毒过表达NONRATT006058 大鼠神经元细胞模型构建
        3.1.6 NONRATT006058 特异性RNA抑制剂感染神经元
        3.1.7 qRT-PCR检测NONRATT006058及Brca1 表达变化
        3.1.8 Westem blot检测Brca1 表达变化
        3.1.9 神经元免疫细胞荧光染色观察突起生长
        3.1.10 统计学分析
    3.2 结果
        3.2.1 NONRATT006058 与其靶基因Brca1 表达变化初步验证
        3.2.2 大鼠神经元细胞原代培养及明确NONRATT006058 定位
        3.2.3 过表达及抑制表达NONRATT006058 大鼠神经元细胞模型构建
        3.2.4 NONRATT006058 在大鼠神经元中可调节Brca1 表达
        3.2.5 NONRATT006058 调控大鼠神经元突起生长
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 长链非编码RNA与脊髓损伤的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3799695