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脑组织来源外泌体在骨折合并脑外伤模型骨愈合中的作用及机制研究

发布时间:2024-02-03 22:45
  临床研究发现,创伤性脑外伤合并骨折的患者,骨折愈合较单一骨折的患者更快,表现为骨折处更多的骨痂生长,甚至身体其他部位出现异位骨化。既往研究指出其可能机制是脑外伤使成骨相关的细胞因子表达上调,通过体液调节的作用促进骨折愈合。外泌体是细胞分泌的一种纳米级别的膜泡,其内含有细胞特异性蛋白、mi RNA和m RNA等,能作为信号分子传递给其他细胞,进而影响其功能。不同细胞分泌的外泌体中包含不同的成分,导致其功能各异。有研究发现外泌体在骨代谢的过程中发挥了重要作用,也有研究发现,创伤后脑组织分泌的外泌体中与成骨相关的mi RNA的表达明显上调。因此,我们以外泌体为切入点,来探究脑外伤促进骨折愈合的机制。第一部分,我们建立小鼠胫骨骨折合并脑外伤模型,通过影像学检查来观察脑外伤对小鼠胫骨骨折处骨痂量的影响。通过对胫骨标本进行组织病理学检查,检测成骨相关标志物的表达情况。结果提示脑外伤能促进骨折部位的骨痂过度生长,以及成骨相关因子的过度表达。第二部分,我们首先建立小鼠胫骨骨折合并脑外伤模型。收集血液样本后,采用超速离心法来提取血浆中的外泌体,并对外泌体进行鉴定。利用CCK-8检测外泌体对成骨细胞增殖的...

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图5RUNX2免疫组化染色结果(10×)

图5RUNX2免疫组化染色结果(10×)

第一部分脑组织来源外泌体在骨折合并脑外伤模型骨愈合中的作用及机制研究免疫组化结果显示:3周时,TF组的骨痂处可见大量Osterix和RUNX2因子阳性表达的细胞,细胞散在分布于骨小梁表面;SF组的两种因子的表达量均较TF组的低。5周时,TF组和SF组的....


图2CCK-8结果*p<0.05

图2CCK-8结果*p<0.05

脑组织来源外泌体在骨折合并脑外伤模型骨愈合中的作用及机制研究3.CCK-8检测MC3T3-E1细胞的增殖率外泌体与ME3T3-E1细胞共培养24h后,CCK-8结果显示TF1组泌体对MC3T3-E1细胞的增殖影响较大。TF1组与SF1组比较,P<....


图3ALP检测结果

图3ALP检测结果

第二部分脑组织来源外泌体在骨折合并脑外伤模型骨愈合中的作用及机制研究4.碱性磷酸酶(ALP)染色及活性检测ME3T3-E1细胞成骨诱导7天,经过TF1组外泌体干预的细胞ALP染色更深,即ALP表达更多。(图3a)ALP活性检测提示TF1组较SF1....


图4WesternBlot结果

图4WesternBlot结果

脑组织来源外泌体在骨折合并脑外伤模型骨愈合中的作用及机制研究第二部分5.WesternBlot检测WesternBlot结果提示TF1组的COL1A1和RUNX2蛋白的表达量较SF1组明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。(图4)



本文编号:3894818

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