mtDNA诱导的PD-L1/PD-1信号分子对T细胞功能的影响

发布时间：2024-03-16 09:49

　　目的:1、观察mt DNA对小鼠腹腔巨噬细胞PD-L1表达的影响;2、以UO126(MEK1/2通路抑制剂),SB203580(p38通路抑制剂),SN50(NF-k B通路抑制剂),LY294002(PI3K通路抑制剂)干预上述信号通路,筛选明显抑制PD-L1表达的细胞通路,并用氯喹(chloroquine,CQ)作用于经mt DNA刺激的巨噬细胞观察p38信号通路的变化,探讨巨噬细胞表达PD-L1的胞内信号传导通路;3、研究mt DNA诱导巨噬细胞对T细胞免疫活性的影响,并通过抗PD-L1单克隆抗体阻断PD-L1/PD-1信号分子改善其对T细胞功能的抑制。方法:采用体外实验研究。1.根据mt DNA浓度,分为3组:空白对照组;1ug/ml mt DNA组;10ug/ml mt DNA。分别加入PBS1ul;1ug/ml mt DNA和10ug/ml mt DNA,24小时提取各组,流式细胞术检测PD-L1表达。根据检测时间不同分为6组,每组均加入10ug/ml mt DNA,分别在0小时、6小时、12,小时、24小时、48小时、72小时提取各组,流式检测PD-L1表达。2.将巨噬细...

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【学位级别】：硕士

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前言
第一部分 mtDNA诱导巨噬细胞表达PD-L1
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 不同浓度mt DNA对小鼠腹腔巨噬细胞PD-L1 分子表达
        2.2 不同时间，相同浓度mt DNA对小鼠腹腔巨噬细胞PD-L1 分子表达
第二部分 P38 细胞通路介导mtDNA诱导巨噬细胞PD-L1 表达
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 流式细胞术检测各信号通路抑制剂对mt DNA诱导的小鼠腹腔巨噬细胞表面PD-L1 分子表达影响
        2.2 P-P38 及P38 蛋白的Western blot结果
第三部分 PD-L1/PD-1 信号分子在mtDNA诱导的巨噬细胞与CD4+T细胞共培养中的作用
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 结果
        2.1 不同培养条件CD4+T细胞体外增殖能力
        2.2 CD4+T细胞与巨噬细胞共培养体系IFN-γ的分泌水平
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历



本文编号：3929477