PNS介导BMP-Smad信号通路调控BMSCs成骨分化的机制研究
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【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图1-1体外剥离幼兔长骨Figure1-1Isolationofyoungrabbitlongbonesinvitro
过全骨髓贴壁法及密度梯度离心法正确分离兔BMSCs,初步建立稳MSCs原代培养体系,掌握BMSCs在体外状态下的细胞形态及生长后续实验提供正常充足的细胞。骨髓贴壁法1)处死:挑选健康的年龄一周以内的新西兰大白兔的幼兔一只,其放置于75%的酒精中,要求酒精没过幼兔表面,浸....
图1-2冲洗骨髓腔获取BMSCsFigure1-2RinsethebonemarrowcavitytoobtainBMSCs
洗骨髓腔:将放置于含有双抗的PBS缓冲液内冲洗,将骨头表面残留的少许双抗尽量冲离骨皿内加入适量的10%FBS培养基,剪刀剪去器在培养皿内抽取FBS培养基,冲洗骨髓腔液流入原培养皿内,然后将冲洗液过滤到新的l注射器收集滤液至10ml离心管内。心、重悬、种瓶:室温下....
图1-3密度梯度离心法分离细胞Figure1-3Separationofcellsbydensitygradientcentrifugation
2000r/min,室温下,离心30分钟,离下分为四层,最上层呈红色,为稀释液层,第层,第三层呈透明状,为分离液层,最下层为取第二层的乳白色淋巴细胞层至另外一个干净内加入10ml的细胞洗涤液,1000r/min,室温,小心加入5ml的PBS缓冲液重悬,然后1....
图1-4原代兔BMSCs培养3天(100×)
d信号通路调控BMSCs成骨分化的机制研究兔BMSCs形态学特征观察分别使用全骨髓贴壁法与密度梯度离心法分离培梯度离心法分离培养得到的兔BMSCs中血细胞者在细胞数量上差别并不大,传代后细胞在体异也不大。在倒置相差显微镜下观察,刚分离大小不等的圆形或卵圆形细胞在培....
本文编号:3963585
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