葫芦素B对骨肉瘤细胞的抑制作用及机制

发布时间：2024-05-12 09:00

　　目的:研究葫芦素B(Cucurbitacin B,CuB)对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用不同浓度的CuB处理骨肉瘤细胞,结晶紫染色、MTT和克隆形成实验检测细胞增殖能力;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期;划痕愈合实验和Transwell小室法分析细胞迁移与侵袭能力;实时荧光定量PCR和Western Blot分别检测MMP2、MMP9、N-cadherin、Vimentin和Snail等迁移与侵袭相关标志物的mRNA和蛋白水平;Western Blot检测细胞周期相关蛋白Cyclin B1和细胞凋亡相关蛋白Bad、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、cleaved PARP的表达;荧光素酶报告基因实验检测肿瘤相关信号途径的活性,Western Blot检测MAPK信号及AKT信号的变化。构建骨肉瘤异位移植瘤模型,观察瘤体生长情况,HE染色分析骨肉瘤肺转移情况,免疫组织化学染色分析Bcl-2、N-cadherin和PCNA表达及p-ERK水平。结果:CuB可抑制骨肉瘤细胞的增...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1CuB抑制骨肉瘤细胞增殖能力Figure1.1CuBinhibitedtheproliferativeabilityofosteosarcomacells.A、B：结晶紫染色实验；C：MTT实验；D、E：克隆形成试验；F：蛋白质印迹实验

图1.1CuB抑制骨肉瘤细胞增殖能力Figure1.1CuBinhibitedtheproliferativeabilityofosteosarcomacells.A、B：结晶紫染色实验；C：MTT实验；D、E：克隆形成试验；F：蛋白质印迹实验。*P＜0.....

图1.2CuB诱导骨肉瘤细胞凋亡Figure1.2CuBinducedapoptosisofosteosarcomacellsA、B：Hoechst染色测定骨肉瘤细胞凋亡；C、D：流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡及凋亡率统计结果

19图1.2CuB诱导骨肉瘤细胞凋亡Figure1.2CuBinducedapoptosisofosteosarcomacellsA、B：Hoechst染色测定骨肉瘤细胞凋亡；C、D：流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡及凋亡率统计结果。*P＜0.05vs0nmo....

图1.3凋亡相关蛋白表达情况

图1.3凋亡相关蛋白表达情况Figure1.3Theexpressionlevelsofapoptosis-relatedproteins2.4CuB诱导骨肉瘤143B和MG63细胞周期阻滞于G2/M期应用FCM法检测CuB对OS细胞周....

图1.4流式细胞术检测骨肉瘤细胞周期分布情况

图1.4流式细胞术检测骨肉瘤细胞周期分布情况Figure1.4CellcycledistributionwascalculatedbyflowcytometryA、B：FCM检测骨肉瘤细胞周期分布及统计结果；C：WesternBlot检测G2/M期周....

本文编号：3971162