低强度脉冲超声介导iPS-NSCs修复脊髓损伤的研究
发布时间：2024-10-05 02:07
【目的】脊髓损伤（Spinal Cord Injury,SCI）是一种严重的创伤性疾病,修复手段主要有手术治疗、药物治疗、细胞移植等。神经干细胞移植能够有效促进SCI后神经功能的恢复,是当前研究的热点。iPSCs诱导的神经干细胞（induced Pluripotent Stem Cells-Neural Stem Cells,iPS-NSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,自体取材避免了伦理学争议和免疫排斥,应用于细胞移植治疗脊髓损伤具有显著的优势。然而干细胞在体内存活率低、向神经方向分化较难,因此如何更好的促进其增殖、定向分化是众多研究者关注的焦点。国内外研究表明低强度脉冲超声（Low Intensity Pulsed Ultrasound,LIPUS）是一种可以促进多种细胞增殖、分化的物理刺激手段,本研究旨在明确LIPUS对iPS-NSCs细胞特性的影响以及LIPUS介导的iPS-NSCs对脊髓损伤的修复作用,为干细胞的优化和SCI的治疗提供一种新的策略。本研究通过:1)体外培养iPS-NSCs,将自主研制的LIPUS激励系统作用于iPS-NSCs细胞,观察细胞的形态...
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、LIPUS激励iPS-NSCs最佳物理参数的研究
1.1 对象和方法
1.1.1 实验器械
1.1.2 实验试剂
1.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建
1.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定
1.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立
1.1.6 CCK-8 检测iPS-NSCs增殖活性
1.1.7 统计学分析
1.2 结果
1.2.1 成功搭建低强度脉冲超声激励系统
1.2.2 iPS-NSCs细胞的形态学观察及细胞鉴定
1.2.3 LIPUS对 iPS-NSCs增殖活性的影响以及最佳激励条件的确定
1.3 讨论
1.3.1 LIPUS在生物组织中的理学效应及其在骨科学中的应用
1.3.2 神经干细胞在神经系统中的起源、特点和作用
1.3.3 诱导神经干细胞的来源及诱导体系
1.3.4 LIPUS对细胞增殖的作用
1.4 小结
二、在最佳生物学参数下,LIPUS优化iPS-NSCs细胞特性的研究
2.1 对象和方法
2.1.1 实验器械
2.1.2 实验试剂
2.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建
2.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定
2.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立
2.1.6 TUNEL检测iPS-NSCs细胞凋亡的情况
2.1.7 ELISA检测iPS-NSCs细胞上清液中神经营养因子的含量
2.1.8 Western Blot检测Notch信号通路及细胞分化情况
2.1.9 统计学分析
2.2 结果
2.2.1 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞凋亡率的变化
2.2.2 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞中NTFs含量的变化
2.2.3 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞分化的情况
2.2.4 LIPUS激励iPS-NSCs后 Notch信号通路相关蛋白含量的变化
2.3 讨论
2.3.1 LIPUS对 iPS-NSCs细胞生物特性的影响
2.3.2 LIPUS激励iPS-NSCs可能的作用机制
2.3.3 LIPUS修复神经损伤的潜力
2.4 小结
三、LIPUS介导iPS-NSCs细胞移植修复脊髓损伤的研究
3.1 对象和方法
3.1.1 实验器械
3.1.2 实验试剂
3.1.3 脊髓损伤动物模型建立
3.1.4 细胞移植
3.1.5 BBB运动功能评分
3.1.6 脊髓标本取出及制作切片
3.1.7 石蜡切片的制备
3.1.8 HE染色
3.1.9 免疫荧光观察移植细胞在体内分化情况
3.1.10 ELISA检测测定脊髓组织内的营养因子的表达情况
3.1.11 统计学分析
3.2 结果
3.2.1 HE染色结果
3.2.2 GFAP、NF200 免疫荧光染色结果
3.2.3 脊髓组织内的营养因子的表达情况
3.2.4 BBB评分结果
3.3 讨论
3.3.1 脊髓损伤动物模型的制备及运动功能评价指标的选择
3.3.2 NSCs在脊髓损伤修复中的作用及应用
3.3.3 多潜能干细胞在神经损伤等再生医学方面的应用
3.3.4 LIPUS介导的iPSc-NSCs修复脊髓损伤可能的作用机制
3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 低强度脉冲超声在神经修复中的应用
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：4007416
【文章页数】：133 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、LIPUS激励iPS-NSCs最佳物理参数的研究
1.1 对象和方法
1.1.1 实验器械
1.1.2 实验试剂
1.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建
1.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定
1.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立
1.1.6 CCK-8 检测iPS-NSCs增殖活性
1.1.7 统计学分析
1.2 结果
1.2.1 成功搭建低强度脉冲超声激励系统
1.2.2 iPS-NSCs细胞的形态学观察及细胞鉴定
1.2.3 LIPUS对 iPS-NSCs增殖活性的影响以及最佳激励条件的确定
1.3 讨论
1.3.1 LIPUS在生物组织中的理学效应及其在骨科学中的应用
1.3.2 神经干细胞在神经系统中的起源、特点和作用
1.3.3 诱导神经干细胞的来源及诱导体系
1.3.4 LIPUS对细胞增殖的作用
1.4 小结
二、在最佳生物学参数下,LIPUS优化iPS-NSCs细胞特性的研究
2.1 对象和方法
2.1.1 实验器械
2.1.2 实验试剂
2.1.3 低强度脉冲超声系统的搭建
2.1.4 iPS-NSCs传代培养及细胞鉴定
2.1.5 低强度脉冲超声激励细胞模型的建立
2.1.6 TUNEL检测iPS-NSCs细胞凋亡的情况
2.1.7 ELISA检测iPS-NSCs细胞上清液中神经营养因子的含量
2.1.8 Western Blot检测Notch信号通路及细胞分化情况
2.1.9 统计学分析
2.2 结果
2.2.1 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞凋亡率的变化
2.2.2 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞中NTFs含量的变化
2.2.3 LIPUS激励iPS-NSCs后细胞分化的情况
2.2.4 LIPUS激励iPS-NSCs后 Notch信号通路相关蛋白含量的变化
2.3 讨论
2.3.1 LIPUS对 iPS-NSCs细胞生物特性的影响
2.3.2 LIPUS激励iPS-NSCs可能的作用机制
2.3.3 LIPUS修复神经损伤的潜力
2.4 小结
三、LIPUS介导iPS-NSCs细胞移植修复脊髓损伤的研究
3.1 对象和方法
3.1.1 实验器械
3.1.2 实验试剂
3.1.3 脊髓损伤动物模型建立
3.1.4 细胞移植
3.1.5 BBB运动功能评分
3.1.6 脊髓标本取出及制作切片
3.1.7 石蜡切片的制备
3.1.8 HE染色
3.1.9 免疫荧光观察移植细胞在体内分化情况
3.1.10 ELISA检测测定脊髓组织内的营养因子的表达情况
3.1.11 统计学分析
3.2 结果
3.2.1 HE染色结果
3.2.2 GFAP、NF200 免疫荧光染色结果
3.2.3 脊髓组织内的营养因子的表达情况
3.2.4 BBB评分结果
3.3 讨论
3.3.1 脊髓损伤动物模型的制备及运动功能评价指标的选择
3.3.2 NSCs在脊髓损伤修复中的作用及应用
3.3.3 多潜能干细胞在神经损伤等再生医学方面的应用
3.3.4 LIPUS介导的iPSc-NSCs修复脊髓损伤可能的作用机制
3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 低强度脉冲超声在神经修复中的应用
参考文献
致谢
个人简历
本文编号：4007416
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/waikelunwen/4007416.html
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