异氟醚对大鼠海马神经元SIRT2及RIP3的影响
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【摘要】:目的:检测不同浓度异氟醚对大鼠海马神经元SIRT2及RIP3的影响。方法:雄性健康清洁级成年SD大鼠52只,体重200~230g,采用随机数字表法,将动物随机分为4组(n=13):对照组(C组)吸入2L/min氧气6 h;0.75%异氟醚组(I 0.75组):吸入2L/min氧气+0.75%异氟醚6h;1.5%异氟醚组(I 0.75组):吸入2L/min氧气+1.5%异氟醚6h;2%异氟醚组(I 0.75组):吸入2L/min氧气+2%异氟醚6h。停药12 h、24 h后取脑组织,用免疫组化法检测SIRT2及RIP3在海马神经元的表达定位,并用Real-time PCR法检测其SIRT2和RIP3mRNA表达。结果:SIRT2及RIP3均表达于大鼠海马细胞质中。与C组和I 0.75组相比,停药12 h I1.5组和I2组海马神经元SIRT2和RIP3 mRNA表达升高(P0.05)。停药24 h后,I 0.75组和I1.5组海马神经元SIRT2 m RNA表达与C组无统计学差异,而I2组SIRT2 mRNA表达降低(P0.05);各组神经元中RIP3 mRNA表达无统计学差异。与停药12 h相比,I1.5组和I2组24 h后SIRT2和RIP3 mRNA表达下降(P0.05)。结论:吸入1.5%和2%异氟醚6 h,停药12 h后大鼠海马神经元中SIRT2和RIP3表达上调;而吸入2%的异氟醚在停药24 h后SIRT2表达下调。
【关键词】:异氟烷 海马 SIRT2 RIP3 RNA
【学位授予单位】:兰州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R614
【目录】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-7
- 第一章 前言7-15
- 1.1 POCD的简述7-9
- 1.1.1 POCD的定义7
- 1.1.2 全身麻醉药物与POCD7-8
- 1.1.3 炎症与POCD8-9
- 1.2 异氟醚9-10
- 1.2.1 异氟醚与Aβ9-10
- 1.2.2 异氟醚诱发炎症的释放及凋亡10
- 1.2.3 其他10
- 1.3 SIRT2简述10-13
- 1.3.1 SIRT2在神经发生中起重要的作用11
- 1.3.2 SIRT2与神经退行性变存在密切关系11-12
- 1.3.3 SIRT2与凋亡12
- 1.3.4 SIRT2与炎症12-13
- 1.4 RIP3简述13-15
- 第二章 材料15-16
- 2.1 实验动物15
- 2.2 主要实验仪器15
- 2.3 主要试剂与药品15-16
- 第三章 实验方法16-20
- 3.1 动物选择与分组16
- 3.2 动物全身麻醉模型的建立16
- 3.3 给药剂量与方法16
- 3.4 标本获取及处理16-17
- 3.5 免疫组织化学方法染色检测海马区SIRT2及RIP3表达17-18
- 3.5.1 石蜡切片17
- 3.5.2 免疫组织化学方法染色17-18
- 3.6 左侧海马SIRT2、RIP3 MRNA表达18-19
- 3.6.1 RNA提取:TRIZOL试剂盒提取18
- 3.6.2 逆转录:PCR→CDNA18
- 3.6.3 引物设计18-19
- 3.6.4 RT-PCR19
- 3.7 统计学分析19-20
- 第四章 结果20-23
- 4.1 SIRT2及RIP3免疫组织化学发表达结果20-21
- 4.2 海马SIRT2、RIP3 MRNA表达结果21-23
- 第五章 讨论23-28
- 5.1 全身麻醉动物模型的建立23-24
- 5.2 异氟醚与 SIRT224-26
- 5.3 异氟醚诱发的凋亡与 RIP3 及 SIRT226-28
- 第六章 结论28-29
- 参考文献29-35
- 英文缩略词35-36
- 综述36-43
- 参考文献41-43
- 在校期间发表的学术论文43-44
- 致谢44
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