髓核细胞来源外泌体对骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的作用

发布时间：2017-08-03 09:04

  本文关键词：髓核细胞来源外泌体对骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的作用

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【摘要】：目的:探讨人髓核细胞(NPCs)外泌体对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的作用。方法:取腰椎间盘突出症患者手术切除的髓核组织,体外分离培养人NPCs,采用差速离心法提取NPCs的外泌体,利用透射电镜及Western blot对外泌体进行大小形态及标志蛋白的检测,同时用PKH67荧光染料标记外泌体后与BMSCs共孵育0.5h、2h、4h,在激光共聚焦显微镜下观察BMSCs对NPCs外泌体的摄取情况;取人BMSCs经NPCs外泌体诱导3d、7d、10d、14d后应用RT-PCR检测BMSCs中蛋白聚糖(ACAN)、SOX-9、Ⅱ型胶原(COL2A1)、角蛋白19(KRT19)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的m RNA表达情况。结果:提取的人NPCs外泌体为直径为30~100nm的圆形或椭圆形结构,其表达CD63和Tsg101,不表达Calnexin蛋白。经PKH67标记的NPCs外泌体可以被BMSCs摄取;经NPCs外泌体诱导后7d开始BMSCs中的ACAN、SOX-9、COL2A1、KRT19及HIF-1α基因m RNA表达均显著性高于未经诱导的BMSCs(P0.05)。结论:在体外实验中,人NPCs可以分泌外泌体并被BMSCs所摄取,诱导BMSCs分化为髓核样细胞,可为椎间盘退变的组织工程修复提供更为简单有效的NPCs来源。
【作者单位】： 第三军医大学附属新桥医院;
【关键词】： 椎间盘退变 外泌体 髓核细胞 骨髓间充质干细胞
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81572208)
【分类号】：R681.5
【正文快照】： qing,400037,China椎间盘退变性疾病(degenerative disc dis-ease,DDD)是引起腰痛的重要原因之一[1]。目前针对DDD的治疗方式为保守治疗、椎间盘切除术、椎间盘置换术以及椎间融合术。这些措施仅能一定程度改善疾病的临床症状,不能从根本上减缓、终止甚至逆转椎间盘退变的进程

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