甲基强的松龙对脊髓损伤后凋亡和自噬作用的影响

发布时间：2017-09-18 11:42

  本文关键词：甲基强的松龙对脊髓损伤后凋亡和自噬作用的影响

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【摘要】：目的研究甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤的神经保护作用及其可能的分子机制,为脊髓损伤的药物治疗提供实验依据。方法1、选用改良Allen's法建立大鼠脊髓(T10)损伤模型,利用透射电镜观察大鼠正常脊髓及脊髓损伤后1d,3d,7d的神经组织超微结构,观察自噬体水平。2、利用BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)评分法分别对sham、SCI及SCI+MP组大鼠在1d,3d,7d,14d,21d,28d的不同时间点的运动功能进行评估。3、体外培养N2a细胞,经MTT检测MP对H_2O_2诱导的N2a细胞的氧化损伤的保护作用。4、将体外培养的N2a细胞加入10μM的MP预处理30 min,再加入100μM H_2O_2干预24 h。倒置生物相差显微镜观察各组细胞生长状态和形态变化。5、流式细胞术和Western blot法检测各组神经细胞凋亡情况。6、免疫荧光检测自噬标志性蛋白LC3-B的表达定位,Western blot法检测自噬相关蛋白表达情况。结果1、透射电镜结果显示脊髓损伤后1天自噬体明显增多。2、MP作用于脊髓损伤后,大鼠BBB评分明显提高。3、MTT检测结果发现,MP预处理可保护N2a细胞免受H_2O_2诱导的氧化损伤。4、倒置生物相差显微镜下我们发现MP能够维持损伤N2a细胞形态和数量。5、流式细胞术和Western Blot表明MP能显著降低神经细胞凋亡。6、免疫荧光结果显示自噬标志性蛋白LC3B主要定位在细胞胞浆,Western blot结果表明MP能够下调神经细胞自噬标志性蛋白LC3-B和Beclin-1表达。结论1.甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤具有一定的神经保护作用。2.甲基强地松龙通过抑制自噬和凋亡来对抗神经细胞的氧化损伤。
【关键词】：甲基强的松龙 脊髓损伤 凋亡 自噬 氧化应激 神经保护
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R651.2
【目录】：

• 中文论著摘要4-6
• 英文论著摘要6-8
• 英文缩略语表8-9
• 前言9-10
• 实验材料和方法10-15
• 结果15-23
• 讨论23-25
• 结论25-26
• 本研究创新性的自我评价26-27
• 参考文献27-30
• 附录30-41
• 一、文献综述 脊髓损伤的研究进展30-38
• 参考文献35-38
• 二、在学期间科研成绩38-39
• 三、致谢39-40
• 四、个人简介40-41

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本文编号：875307