miR-155抑制HG诱导的晶状体上皮细胞凋亡及其分子机制的研究

发布时间：2020-05-23 05:10

【摘要】：目的探讨mi R-155对人晶状体上皮细胞(HLEpi C)和SD大鼠高糖诱导的细胞凋亡的抑制作用。方法采用细胞实验MTT法检测mi R-155的最佳药物浓度及不同浓度葡萄糖培养基对细胞增殖的影响,并进行晶状体体外培养实验验证,动物实验组包括:5.5 mol/L正常糖组(LG),25 mol/L甘露醇组(M),25 mol/L高糖培养基组(HG),高糖培养基处理的mi R-155(30 nmol/L)给药组。确定最佳药物浓度后,建立细胞实验组,将HLEpi C用正常糖组(LG)处理至30%-40%的密度,并设置不同的培养组进行药物处理。培养组包括:正常糖组(LG),25 mol/L甘露醇组(M),25 mol/L高糖培养基组(HG),高糖培养基处理30 nmol/L的mi R-155的激动剂mimic和药物对照CTm组。Western blot检测不同处理组细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和procaspase-9的表达是否有差异。通过细胞划痕实验观察mimic对HLEpi C细胞迁移的影响。结果动物实验表明,当mi R-155的激动剂mimic浓度为30 nmol/L时,可以改变由高葡萄糖引起的晶状体浊度的变化。细胞实验结果表明,随着培养基中葡萄糖浓度的增高,细胞促凋亡率越高,当30 nmol/L的mimic作用于细胞时,对HLEpi C的增殖和迁移具有显着影响。在western blot实验中,mimic能显着抑制高糖诱导的HLEpi C凋亡和SD大鼠晶状体蛋白的凋亡,改变凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3以及凋亡起始蛋白caspase-9的前体蛋白procaspase-9表达量,使促凋亡率明显低于高糖对照组。结论mi R-155可抑制高糖诱导的HLEpi C和SD大鼠细胞凋亡。
【图文】：

17图 1 miR-155 对 HLEpiC 细胞形态的影响Fig 1 Effect of miR-155 on HLEpiC cell morphology55 对 HLEpiC 细胞增殖的影响TT 检测不同梯度药物浓度对由高糖诱导的 HLEpiC 的改善情结果可以证明，在 48 h 时，药物已经发挥作用，根据数据处理药浓度为 100 nM、60 nM、30 nM、15 nM、7.5 nM。高糖可以，与高糖培养对照组相比，mimic 用药浓度为 30nM 时数据分析 数据分析结果如下：mimic 用药 30 nM（F=24.135,P=0.001

安徽医科 大学硕士学位 论文（ F=8.397,P=0.02 ） ,100 nM （ F=13.119,P=0.007 ） ； CTm 用 药 30 nM（F=6.118,P=0.038）,60 nM（F=7.919,P=0.023）,100 nM（F=11.114,P=0.01）。随着 mimic 药物浓度的增加，改善作用增强，在药物浓度为 30 nM 的时候，药物作用效果最好，，随着药物浓度的继续增加，药物的作用效果开始下降。实验重复 3 次以上。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R776.1

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本文编号：2677196