5-羟色胺转运体基因启动子区多态性与肠易激综合征

发布时间：2017-04-11 06:26

  本文关键词：5-羟色胺转运体基因启动子区多态性与肠易激综合征，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：肠易激综合征(irritable bowel syndrome, IBS)是临床上最常见的功能性肠病(functional bowel disorders, FBDs),其病因及发病机制尚未完全清楚。临床主要表现为腹痛或腹部不适及大便习惯、性状的改变。5-羟色胺是肠管动力的一种重要神经递质,在肠蠕动、分泌及脑-肠轴的感觉信号传递中发挥关键作用。5-羟色胺转运体(SERT)是一种对5-HT有高度亲和力的跨膜转运蛋白,可以将效应部位的5-HT迅速再摄取,并对其灭活。本课题旨在研究SERT基因多态性对SERT表达、下游基因转录的影响并探讨与临床IBS症候群和精神心理症状的关系。 方法：依据罗马Ⅲ诊断标准选取C-IBS患者95例、D-IBS患者116例、A-IBS患者43例,并取健康对照120例,本课题由以下四个部分构成： 第一部分：从全血中提取DNA,应用PCR进行SERT基因启动子区多态性(5-HTTLPR)的扩增,琼脂糖电泳分析5-HTTLPR多态性,并分析5-HTTLPR多态性与IBS的关系。 第二部分：从全血中提取DNA,应用PCR扩增包含5-HTTLPR多态性等位基因的启动子区,应用荧光素酶报告基因检测系统研究该启动子对下游基因转录水平的影响和调控。 第三部分：从结肠粘膜组织中提取SERT蛋白,通过Western blot检测SERT蛋白的表达量,并与5-HTTLPR多态性联合分析,研究分析不同5-HTTLPR多态性基因型与结肠粘膜SERT蛋白表达量的关系。 第四部分：应用精神心理症状自评量表(SCL-90)及症状积分对所有研究对象进行研究,并与SERT基因多态性、SERT表达、启动子功能做相关性分析。 结果：SERT基因5-HTTLPR多态性可以通过影响其下游SERT蛋白的表达,进而导致IBS患者躯体及精神症状的出现。 第一部分：观察到两种5-HTTLPR等位基因,L型及S型,并组成了3种基因型。5-HTTLPR基因型在IBS和对照组之间分布无统计学意义(χ2= 1.092, P=0.5790.05); C-IBS组L/L频率及L等位基因频率显著高于对照组(χ2=9.385, P=0.0020.01;χ2=5-537, P=0.0190.05)。IBS各亚型之间分布有统计学意义(χ2=19.035,P=0.0010.01)；将D-IBS、A-IBS组合并,C-IBS组L/L频率显著高于D-IBS、A-IBS组(χ2=15.111,P0.01)；将C-IBS、A-IBS组合并,D-IBS组S/S频率显著高于C-IBS、A-IBS组(χ2=10.843,P=0.0010.01)。 第二部分：L型等位基因的基础转录活力比S型等位基因要高,差异有统计学意义(P0.01)。 第三部分：L/L型较L/S型和S/S型具有较高的蛋白表达效率(P0.01),而L/S型与S/S型的蛋白表达效率差异无统计学意义(P0.05)。 第四部分：IBS组与对照组蛋白表达量无差异(P0.05)；但不同IBS亚型SERT蛋白的表达量差异具有统计学意义,其中C-IBS蛋白表达量高于A-IBS、D-IBS和对照组(P0.05), A-IBS蛋白表达量与D-IBS蛋白表达量无差异性(P0.05)。 SERT蛋白表达量与躯体化症状(P0.01,r=-0.67)、抑郁因子(P0.01,r=-0.81)、焦虑因子(P0.01,,r=-0.72)和敌对因子(P0.01,r=-0.66)呈负相关；与人际关系敏感、强迫症状、恐怖、偏执和精神病因子均不存在相关性(P0.05)。 结论：SERT基因5-HTTLPR多态性可通过影响下游SERT蛋白的表达效率而出现不同的IBS亚型及相应征候群,并对其精神心理因素产生影响。具有L/L基因型的人群易患C-IBS,而具有S/S基因型的人群更易患D-IBS; L型等位基因的基础转录活力比S型等位基因要高；L/L型较L/S型和S/S型具有较高的蛋白表达效率；结肠黏膜SERT蛋白的含量可影响IBS患者的部分精神症状,SERT蛋白含量越少患者越容易出现躯体化、焦虑、抑郁和敌对的情绪表现。研究表明SERT在IBS的发生和发展中发挥了重要的作用。
【关键词】：5-羟色胺转运体 肠易激综合症 多态性 蛋白印记 报告基因
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R574
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-11
• 前言11-14
• 研究现状、成果11-13
• 研究目的、方法13-14
• 一、SERT基因5-HTTLPR多态性14-23
• 1.1 对象和方法14-18
• 1.1.1 研究对象14-15
• 1.1.2 试剂15
• 1.1.3 仪器15-16
• 1.1.4 方法16-18
• 1.2 结果18-20
• 1.2.1 基因型类型18-19
• 1.2.2 SERT启动子区5-HTTLPR多态性位点基因型及等位基因频率19-20
• 1.3 讨论20-22
• 1.4 小结22-23
• 二、SERT等位基因与细胞SERT蛋白表达的关系23-31
• 2.1 对象和方法23-27
• 2.1.1 细胞23
• 2.1.2 试剂23-24
• 2.1.3 方法24-27
• 2.2 结果27-28
• 2.3 讨论28-30
• 2.4 小结30-31
• 三、5-HTTLPR基因多态性与组织SERT蛋白表达的关系31-38
• 3.1 对象和方法31-34
• 3.1.1 组织材料31
• 3.1.2 试剂31
• 3.1.3 主要仪器31-32
• 3.1.4 方法32-34
• 3.2 结果34-35
• 3.3 讨论35-37
• 3.4 小结37-38
• 四、SERT蛋白含量与临床症状的联系38-46
• 4.1 对象和方法38
• 4.1.1 SERT蛋白含量测定38
• 4.1.2 精神症状调查38
• 4.1.3 统计方法38
• 4.2 结果38-41
• 4.2.1 SERT蛋白与IBS症候群的关系38-40
• 4.2.2 SERT蛋白与精神症状的关系40-41
• 4.3 讨论41-44
• 4.3.1 SERT蛋白含量与IBS症候群的关系41-43
• 4.3.2 SERT蛋白含量与精神症状的关系43-44
• 4.4 小结44-46
• 结论46-47
• 参考文献47-52
• 发表论文和参加科研情况说明52-53
• 附录53-57
• 综述 5-羟色胺转运体基因启动子区多态性与肠易激综合征57-68
• 综述参考文献63-68
• 致谢68

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