红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤

发布时间：2017-10-17 01:29

  本文关键词：红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤

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【摘要】：目的研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法实验一部分:使用不同浓度(0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、4 mmol/L)同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),处理24小时后,使用MTT法检测HUVECs生存率。实时荧光定量PCR法(Realtime PCR,rt PCR)检测免疫球蛋白重链结合蛋白(binding immunoglobulin protein,Bip)和C/EBP同源蛋白(transcriptional factor C/EBP homologous protein,CHOP)的基因转录水平。Western blot法检测Bip、CHOP蛋白表达水平,PKR内质网激酶(protein kinase RNA(PKR)-like ER kinase,PERK)、内质网核信号转导蛋白1α(inositol-requiring protein-1α,IRE1α)、磷酸化水平。实验二部分:预先使用不同浓度的红景天苷(Salidroside,Sal)(3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L)预处理HUVECs 2小时,再根据实验一的结果,挑选出合适浓度的Hcy(1mmol/L),加入HUVECs中共同培养一段时间。使用实验一介绍方法检测各指标。结果Hcy组细胞生存率低于空白对照组(P0.05),Bip和CHOP的基因表达量和蛋白表达量显著升高(P0.05),PERK和IRE1α的磷酸化水平在较短时间内升高(P0.05)。高浓度红景天苷(300μmol/L)与Hcy共同作用组的细胞生存率显著高于仅有Hcy刺激的实验对照组(P0.05),并且Bip和CHOP的基因表达和蛋白表达均下降(P0.05),PERK和IRE1α的磷酸化水平均下调(P0.05)。结论红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVECs损伤具有保护作用,机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。
【关键词】：动脉粥样硬化 内皮细胞 高同型半胱氨酸血症 红景天苷 内质网应激
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.4;R589
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 引言7-11
• 实验一 高同型半胱氨酸对内皮细胞的损伤作用及机制11-23
• 一、材料与方法11-17
• 二、结果17-19
• Hcy对HUVECs活性的影响17-18
• Hcy诱导HUVECs中Bip和CHOP的表达18
• Hcy诱导HUVECs中内质网应激相关蛋白的活化18-19
• 三、讨论19-23
• 实验二 红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及机制23-29
• 一、材料与方法23-25
• 二、结果25-27
• 红景天苷抑制Hcy诱导的内皮细胞的损伤作用25
• 红景天苷对Hcy诱导的HUVECs Bip和CHOP表达的影响25-26
• 红景天苷对Hcy诱导的HUVECs内质网应激信号分子表达的影响26-27
• 三、讨论27-29
• 结论29-30
• References30-36
• 综述36-43
• 引用文献39-43
• 中英文对照缩略词表43-45
• 攻读学位期间发表学术论文45-46
• 致谢46-47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李录;贾绍斌;孙娜;;同型半胱氨酸对内皮细胞Bcl-2基因甲基化水平的影响[J];中国动脉硬化杂志;2013年12期

2 靳荣光;王秋娟;刘继平;颜天华;王彦;曹永兵;;红景天苷治疗冠心病相关药理作用研究进展[J];西北药学杂志;2013年02期

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本文编号：1046050