AMPK对低氧诱导血管生成作用的研究

发布时间：2017-10-24 19:06

  本文关键词：AMPK对低氧诱导血管生成作用的研究

  更多相关文章： AMPK 缺血 血管生成 人脐静脉内皮细胞

【摘要】：目的：建立简单有效且重复性高的人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical VeinEndothelial Cells，HUVECs)体外原代培养及传代技术，，并对培养的细胞进行鉴定。探讨低氧条件下AMPK对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响，为缺血性疾病的治疗提供相应的理论基础。 方法：HUVECs的原代分离培养：采用I型胶原酶灌注消化法从脐静脉分离内皮细胞，并用人第Ⅷ因子相关抗原抗体免疫荧光染色法进行鉴定。通过MTT检测低氧对细胞活性的影响；采用蛋白免疫印迹法检测空白对照组与低氧处理组p-AMPK/AMPK蛋白的表达。实验分为5组：空白组、低氧组(0.2mM CoCl2)、低氧+Compound C(20μM)、低氧+C75(10μM)和正常+VEGF(100ng/ml)组。划痕试验检测人脐静脉内皮细胞迁移能力；小管形成实验法检测内皮细胞体外血管形成能力。 结果：第Ⅷ因子相关抗原抗体免疫荧光检测：细胞核为蓝色，胞质内有红色的染色颗粒；而对照组(PBS液)胞质内无红色的染色颗粒，呈阴性反应。确定低氧模型CoCl2的浓度为0.2mM，建立了较好的低氧实验模型。低氧处理较正常培养的人脐静脉细胞其AMPK磷酸化水平有明显的增高，与正常组相比，低氧组可以诱导内皮细胞的迁移和小管形成能力(p0.05)，给予AMPK相关抑制剂能抑制低氧诱导的迁移和小管形成能力(p0.05)。 结论：实验结果表明，低氧可激活AMPK的磷酸化，促进人脐静脉内皮细胞的迁移和血管生成。
【关键词】：AMPK 缺血 血管生成 人脐静脉内皮细胞
【学位授予单位】：湖北科技学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R543
【目录】：

• 缩略词5-6
• 中文摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 材料与方法10-14
• 实验方法14-20
• 实验结果20-25
• 讨论25-27
• 结论27-28
• 参考文献28-32
• 综述32-40
• 参考文献36-40
• 致谢40

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本文编号：1090097