MDS患者外周血单个核细胞端粒异常及相关机制研究

发布时间：2017-12-13 11:05

  本文关键词：MDS患者外周血单个核细胞端粒异常及相关机制研究

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【摘要】：目的:通过检测MDS患者外周血单个核细胞及T细胞中hTERT选择性剪接变异体的表达并分析其与端粒酶活性,端粒长度及hTERT表达的相关性,阐明MDS患者端粒异常的相关分子机制。方法:收集30例健康供者外周血与30例MDS患者外周血,通过密度梯度离心方法分离出外周血单个核细胞,Ficoll法联合Human T cell enrichment cocktail分离外周血T细胞,Real-time PCR方法检测外周血单个核细胞及T细胞的端粒酶逆转录酶(hTERT)选择性剪接变异体的表达。Real-time PCR方法测量外周血单个核细胞及T细胞的端粒长度及hTERT的表达。端粒酶重复序列扩增法(TRAP)-Elisa检测MDS患者及健康供者外周血单个核细胞及T细胞端粒酶活性。用Spearman相关分析方法分析MDS患者及健康对照者外周血单个核细胞及T细胞hTERT选择性剪接变异体与端粒酶活性,端粒长度及hTERT表达之间的相关性。结果:检测结果显示MDS患者外周血单个核细胞hTERT选择性剪接变异体α+β+及变异体α+β-的表达较健康对照者升高(n=30,p=0.016;n=30,p=0.002)。与健康对照者相比,MDS患者外周血单个核细胞端粒长度明显缩短(n=30,p=0.002);端粒酶活性及hTERT表达升高(n=30,p=0.022;n=30,p=0.007)。相关性分析结果显示,MDS患者外周血单个核细胞端粒酶活性只与hTERT表达量相关;MDS患者外周血单个核细胞hTERT选择性剪接变异体、hTERT表达、端粒长度、端粒酶活性与患者临床病历资料无明显相关性。MDS患者外周血T细胞hTERT选择性剪接变异体表达较健康对照者升高,其中变异体α+β-的表达较对照者升高(n=20,p0.001),变异体α+β+的表达也较对照者升高,但差异无统计学意义(n=20,p=0.09)。MDS患者外周血T细胞端粒酶活性及hTERT表达较健康对照者升高(n=20,p=0.002;n=20,p=0.001),端粒长度较正常对照组缩短(n=20,p0.001)。相关性分析结果显示,MDS患者外周血T细胞端粒酶活性只与hTERT表达量相关;与hTERT选择性剪接变异体表达及端粒长度无相关性。结论:MDS外周血单个核细胞及T细胞端粒长度较健康对照者缩短,端粒酶活性及hTERT表达升高;MDS外周血单个核细胞及T细胞hTERT选择性剪接变异体的表达水平与端粒酶活性及hTERT表达无相关性,其端粒酶活性与hTERT的表达有关。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R551.3

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本文编号：1284889