尿酸诱导人脐静脉内皮细胞CRP表达及其氧化应激机制

发布时间：2016-10-29 10:44

  本文关键词：血管内皮细胞的功能以及损伤修复与动脉粥样硬化，由笔耕文化传播整理发布。

《川北医学院》 2012年

尿酸诱导人脐静脉内皮细胞CRP表达及其氧化应激机制

杜利君  

【摘要】：目的：探讨尿酸（Uric acid, UA）对人脐静脉内皮细胞（Humanumbilical vein endothelial cells, HUVECs）C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）基因转录和蛋白表达的影响及其氧化应激机制。 方法：将不同浓度的尿酸（0mg/dl, 4mg/dl, 8mg/dl, 12mg/dl, 16mg/dl）分别与HUVECs作用12h，以及将12mg/dl尿酸与HUVECs分别作用不同时间（6h, 12h, 24h, 48h），，采用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-timequantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）检测HUVECs CRPmRNA水平；免疫印迹法（Western blot, WB）检测HUVECs CRP蛋白表达量；特异性荧光探针2′, 7′-二氯荧光素二乙酸酯（2′,7′-Dichlorofluorescindiacetate, DCFH-DA）检测HUVECs活性氧簇（Reactive oxygen species,ROS）水平，并观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine, NAC）对尿酸诱导HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表达量的影响。 结果：与正常对照组比较，8~16mg/dl尿酸可明显诱导HUVECs CRPmRNA和蛋白表达（p0.05），其诱导效应随尿酸浓度增加而增强；12mg/dl尿酸呈时间依赖性显著诱导HUVECs CRP mRNA和蛋白表达，CRP表达在6h明显增加（p0.05），12h达最高峰（p0.01）。与12mg/dl尿酸刺激组比较，NAC可显著抑制尿酸诱导HUVECs ROS水平（p0.05）、CRPmRNA和蛋白表达量（p0.01）。 结论：尿酸呈时间和剂量依赖性诱导HUVECs CRP表达。其机制可能与尿酸上调HUVECs ROS水平有关，提示尿酸介导的氧化应激和炎症反应可能共同参与了内皮细胞的损伤。

【关键词】：
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363
【目录】：

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本文编号：157451