改良的两步复合酶消化法制备大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞

发布时间：2018-07-23 16:29

【摘要】：目的本文报道一种基于复合酶消化法进行改良的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的分离方法。方法采用胶原酶、胰肽酶复合酶对胸主动脉进行初步消化去除内外膜、再对中膜进行二次消化释放血管平滑肌细胞。结果细胞分离后贴壁生长,多具梭形形态,呈现典型的"峰-谷"生长状态,1周可进行传代;多种收缩型血管平滑肌细胞的分子标记基因均在所分离培养的细胞中高表达;超过95%的细胞为alpha smooth muscle actin(α-SMA)和myosin-II显著阳性。结论本分离方法简捷易行、重复性好,所得细胞活性佳、纯度高,可确保短时间内获得大量收缩型血管平滑肌细胞。
[Abstract]:Aim to report a modified method for isolation of vascular smooth muscle cells from rat thoracic aorta based on complex enzyme digestion. Methods the internal and external membrane of thoracic aorta was preliminarily digested by collagenase and tryptidase complex enzyme, and vascular smooth muscle cells were released by secondary digestion of the middle membrane. Results the cells were adherent to the wall and grew in fusiform shape, showing a typical "peak-valley" growth state for one week, and the molecular marker genes of many constrictive vascular smooth muscle cells were highly expressed in the isolated and cultured cells. More than 95% of the cells were alpha smooth muscle actin (伪 -SMA) and myosin-II positive. Conclusion this method is simple, reproducible, and has high activity and purity, which can ensure the production of a large number of constrictive vascular smooth muscle cells in a short time.
【作者单位】： 西南交通大学材料先进技术教育部重点实验室;西南交通大学材料科学与工程学院;
【基金】：国家自然科学基金(编号:81371675,81330031)
【分类号】：R54

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