ATRQβ-001疫苗对动脉粥样硬化的保护作用及其机制研究

发布时间：2018-07-25 19:38

【摘要】：研究目的及背景：在前期研究中,我们已经成功制备了针对血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)胞外段第二环的短肽疫苗ATRQβ-001,该疫苗能够显著降低模式动物的血压,具有良好的靶器官保护作用。大量有关肾素-血管紧张素系统(RAS)的研究表明,不仅仅在血压的调控方面,在动脉粥样硬化的病理进展过程中,RAS也同样起着十分重要的作用。其中大部分生物效应是由血管紧张素Ⅱ受体1型(AT1R)的激活所介导的。本研究主要评价疫苗干预后的ApoE-/-小鼠动脉粥样斑块的病变程度,并与传统血管紧张素受体阻断剂(ARB)对比,深入探究该疫苗对动脉粥样硬化保护作用的机制以及与传统化药的不同作用特性,为动脉粥样硬化的防治提供一种新的手段。研究方法：以5周龄雄性ApoE-/-小鼠作为模式动物,给予西方饮食,对比不同干预方式的作用下(A:ATRQβ-001疫苗免疫组；B：缬沙坦灌胃组；C：Qp载体免疫组：D： 空白对照组),动脉硬化的病变情况。主要包含以下几个方面：1.检测疫苗免疫后Anti-ATR抗体滴度及维持情况;2.在体水平评估各干预组动脉粥样斑块的病变程度及病理特点,包括油红染色评价斑块大小,组化及HE染色评估斑块稳定程度,斑块区域炎症反应程度,炎症因子水平。TUNEL凋亡染色及免疫荧光评价凋亡程度,局部区域巨噬细胞的极化。放射免疫法测定RAS激活水平等；3.离体水平评价Anti-ATR抗体对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的炎症反应、细胞凋亡的抑制作用；4.离体环境下研究Anti-ATR抗体对巨噬细胞脂质代谢的干预作用。结果：1. ATRQβ-001疫苗可以刺激模式动物产生高滴度的Anti-ATR抗体,抗体滴度经过3次加强免疫后维持在较高水平,直到实验研究结束；2.ATRQβ-001疫苗能有效阻断AT1R的激活,减少高脂喂养下ApoE-/-小鼠的动脉粥样斑块的形成,稳定粥样斑块, 降低斑块区域炎症水平(VCAM-1,MCP-1,IL-1p等)及血管凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)表达量,减少细胞凋亡发生,同时,可以促进斑块区域内巨噬细胞向M2型方向分化；3.在离体环境下,Anti-ATR抗体可以减少由AngⅡ诱导的内皮细胞的凋亡,抑制巨噬细胞对氧化性低密度脂蛋白的内吞酯化,促进摄取脂质的水解排出；4.与化药组相比,ATRQβ-001疫苗组在有效阻断AT1R的同时,没有反馈激活循环中的RAS。在实验结束后,疫苗组动物未见明显免疫性损伤表现(心、肾病理切片),疫苗的安全性得到初步验证。总结：ATRQβ-001疫苗可以有效减少高脂喂养下ApoE-/-小鼠动脉粥样斑块的形成,稳定斑块。其具体机制主要是通过对局部AT1R的抑制,降低由AngⅡ引起的斑块区域炎症浸润及凋亡的发生,抑制斑块区域泡沫细胞的形成,调节局部巨噬细胞的分化极性来实现。除此之外,和传统化药相比,不反馈性激活循环RAS也是它的一个独特的优势。
[Abstract]:Objective and background: in previous studies, we have successfully prepared a short peptide vaccine against the second ring of extracellular segment of angiotensin 鈪，

本文编号：2144864