microRNA-152对影RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积的响及其靶基因验证

发布时间：2018-07-26 06:32

【摘要】：目的探讨micro RNA-152(mi R-152)对ox-LDL刺激下的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积的影响及其靶基因的确定。方法小鼠RAW264.7巨噬细胞分为两组,mi R-152组和阴性对照组。ox-LDL刺激两组细胞48 h后,酶荧光学法测定各组细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、胆固醇酯(cholesterolester,CE)的含量和TC/CE比例。生物信息学方法、双荧光素酶报告及实时荧光定量PCR和Western blot证实mi R-152的下游靶基因。结果与对照组相比,mi R-152组巨噬细胞内TC和CE含量增加,CE/TC的比值明显升高;并且,mi R-152组ABCAl的m RNA和蛋白表达水平较对照组明显降低。结论 mi R-152能够促进ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积,其机制可能与靶向调控ABCA1有关。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of micro RNA-152 (mi R-152) on cholesterol accumulation in RAW264.7 macrophages stimulated by ox-LDL and to identify its target gene. Methods Murine RAW264.7 macrophages were divided into two groups (n = 48). After stimulation with ox-LDL for 48 h, the contents of total cholesterol (TC), cholesterol ester (CE) and TC/CE ratio were measured by enzyme fluorescence assay. The downstream target gene of mi R-152 was confirmed by bioinformatics method, double luciferase report and real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. Results compared with the control group, the ratio of TC and CE in macrophages was significantly increased and the expression level of m RNA and protein in ABCAl was significantly decreased in the mi-R-152 group compared with the control group. Conclusion MiR-152 can promote the accumulation of cholesterol in RAW264.7 macrophages induced by ox-LDL, and its mechanism may be related to the targeted regulation of ABCA1.
【作者单位】： 首都医科大学电力教学医院肾内科;上海交通大学医学院附属第九人民医院内分泌科;
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81400802)
【分类号】：R543.5

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本文编号：2145165