普罗布考对炎性单核细胞亚群分化的影响及可能机制

发布时间：2018-07-28 20:40

【摘要】：目的探讨普罗布考对炎性单核细胞亚群分化的影响及其可能机制。方法用8周龄C57BL/6小鼠制备脾脏单细胞悬液,以100 k U/L重组干扰素γ诱导单核细胞亚群分化,再以25、50、100μmol/L普罗布考干预,观察其对各单核细胞亚群分化的影响。用抗-CD11b-PE及抗-Ly-6C-FITC抗体进行细胞染色,通过流式细胞仪检测各单核细胞亚群的分化情况,再以Flowjo软件进行数据分析。利用细胞内细胞因子染色法,以2',7'-二氯荧光素二乙酸酯探针,通过流式细胞仪检测各单核细胞亚群中活性氧(ROS)水平。用NADPH氧化酶试剂盒检测人单核细胞系THP-1细胞内NADPH氧化酶活性。结果 25、50、100μmol/L普罗布考呈浓度依赖性地抑制脾脏原代细胞中Ly-6C~(hi)炎性单核细胞亚群的分化。Ly-6C~+炎性单核细胞亚群中ROS水平是Ly-6C~-炎性单核细胞亚群的2倍,同时25、50、100μmol/L普罗布考呈浓度依赖性地抑制Ly-6C+炎性单核细胞亚群中ROS的产生。100μmol/L普罗布考显著抑制THP-1细胞内NADPH氧化酶的活性。结论普罗布考可能通过干预NADPH氧化酶活性,从而抑制Ly-6Chi炎性单核细胞亚群的分化及其ROS的产生。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of probucol on the differentiation of inflammatory monocyte subsets and its possible mechanism. Methods the splenic monocyte suspension was prepared in 8-week-old C57BL/6 mice, and the differentiation of monocyte subsets was induced by 100kUL recombinant interferon 纬, and then treated with 2550100 渭 mol/L propobucol to observe its effect on the differentiation of monocyte subsets. The cells were stained with anti-CD11b-PE and anti-Ly-6C-FITC antibodies. The differentiation of monocyte subsets was detected by flow cytometry, and the data were analyzed by Flowjo software. The levels of reactive oxygen species (ROS) in monocyte subsets were detected by flow cytometry with a 2-chloride-dichlorofluorescein diacetate probe and intracellular cytokine staining. The activity of NADPH oxidase in human monocyte THP-1 cells was detected by NADPH oxidase assay kit. Results Probucol (2550 渭 mol/L) inhibited the differentiation of Ly-6C- (hi) inflammatory monocyte subsets in a concentration-dependent manner. The level of ROS in Ly-6C- (hi) inflammatory monocyte subsets was twice as high as that in Ly-6Ca-inflammatory monocyte subsets. At the same time, Probucol (2550 渭 mol/L) inhibited the production of ROS in Ly-6C inflammatory monocytes in a concentration-dependent manner. 100 渭 mol/L probucol significantly inhibited the activity of NADPH oxidase in THP-1 cells. Conclusion Probucol may inhibit the differentiation of Ly-6Chi inflammatory monocyte subsets and the production of ROS by interfering with the activity of NADPH oxidase.
【作者单位】： 中国医科大学附属盛京医院心内科;
【基金】：国家自然科学基金项目(81200199)
【分类号】：R543.5

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本文编号：2151513