载血管内皮生长因子层层自组装提高异种去细胞血管生物相容性
发布时间：2019-10-09 10:22
【摘要】：目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)结合肝素/壳聚糖层层自组装技术修饰异种去细胞血管,提高其生物相容性。方法采用肝素/壳聚糖在异种去细胞血管表面层层自组装,以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)进行化学交联,并负载VEGF。采用扫描电镜检测血管表面微结构,甲苯胺蓝法定量分析肝素结合量及缓释性能,采用ELISA法定量分析VEGF结合量及缓释性能,抗凝血活性和血小板黏附试验检测材料血液相容性,采用细胞增殖试验评价材料的细胞增殖能力。结果肝素/壳聚糖层层自组装在异种去细胞血管表面形成纳米颗粒样结构,EDC化学交联显著降低肝素及VEGF释放速率,并提高血管的血液相容性。层层自组装/化学交联并负载VEGF促进内皮细胞增殖。结论载VEGF层层自组装技术修饰异种去细胞血管,能够改善其生物相容性,促进内皮细胞增殖。
【图文】：
26山东大学学报(医学版)55卷5期图1DS组和LBL5/EDC-DS组表面微结构的表达A:DS组(×5000);B:DS组(×10000);C:LBL5/EDC-DS组(×5000);D:LBL5/EDC-DS组(×10000)。Fig．1MicrostructureofDSandLBL5/EDC-DSgroupsA:DSgroup(×5000);B:DSgroup(×10000);C:LBL5/EDC-DSgroup(×5000);D:LBL5/EDC-DSgroup(×10000)．表1不同时间点各组肝素释放百分比(n=8)释放天数(d)LBL5/EDC-DS组LBL5-DS组126．8±4．1*43．5±9．1341．7±6．2*66．8±7．9750．7±8．7*75．2±15．11059．7±11．4*84．3±10．81465．9±7．2*89．4±6．9*P＜0．05vs同一时间点LBL5-DS组。表2不同时间点各组VEGF释放百分比(n=8)时间(d)50ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8时间(d)200ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一浓度VEGF下LBL5/EDC-DS组。图2各组VEGF释放曲线的表达Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS组和LBL5/EDC-DS组血管片对血液相容性的影响DS组血管片表面可见少量血小板黏附，血小板伸出大量颗粒状伪足。10个不同平面计数血小板为(60±12)个/cm2。LBL5/EDC-DS组表面血小板数量明显减少，血小板形态较为规则，未形成伪足，10个不同平面计数血小板为(12±5)个/cm2
同时间点各组VEGF释放百分比(n=8)时间(d)50ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8时间(d)200ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一浓度VEGF下LBL5/EDC-DS组。图2各组VEGF释放曲线的表达Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS组和LBL5/EDC-DS组血管片对血液相容性的影响DS组血管片表面可见少量血小板黏附，血小板伸出大量颗粒状伪足。10个不同平面计数血小板为(60±12)个/cm2。LBL5/EDC-DS组表面血小板数量明显减少，血小板形态较为规则，未形成伪足，10个不同平面计数血小板为(12±5)个/cm2。见图3。如表3所示，，DS组血管片无抗凝血活性。与DS组比较，LBL5/EDC-DS组血管片各个时间点
【作者单位】： 山东大学附属省立医院心外科;山东大学附属省立医院妇科;中南大学湘雅二医院心外科;
【基金】：山东省医药卫生科技发展计划(2013WS0115)
【分类号】：R318.08;R54
本文编号：2546724
【图文】：
26山东大学学报(医学版)55卷5期图1DS组和LBL5/EDC-DS组表面微结构的表达A:DS组(×5000);B:DS组(×10000);C:LBL5/EDC-DS组(×5000);D:LBL5/EDC-DS组(×10000)。Fig．1MicrostructureofDSandLBL5/EDC-DSgroupsA:DSgroup(×5000);B:DSgroup(×10000);C:LBL5/EDC-DSgroup(×5000);D:LBL5/EDC-DSgroup(×10000)．表1不同时间点各组肝素释放百分比(n=8)释放天数(d)LBL5/EDC-DS组LBL5-DS组126．8±4．1*43．5±9．1341．7±6．2*66．8±7．9750．7±8．7*75．2±15．11059．7±11．4*84．3±10．81465．9±7．2*89．4±6．9*P＜0．05vs同一时间点LBL5-DS组。表2不同时间点各组VEGF释放百分比(n=8)时间(d)50ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8时间(d)200ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一浓度VEGF下LBL5/EDC-DS组。图2各组VEGF释放曲线的表达Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS组和LBL5/EDC-DS组血管片对血液相容性的影响DS组血管片表面可见少量血小板黏附，血小板伸出大量颗粒状伪足。10个不同平面计数血小板为(60±12)个/cm2。LBL5/EDC-DS组表面血小板数量明显减少，血小板形态较为规则，未形成伪足，10个不同平面计数血小板为(12±5)个/cm2
同时间点各组VEGF释放百分比(n=8)时间(d)50ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8时间(d)200ngVEGFLBL5-DS组LBL5/EDC-DS组131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一浓度VEGF下LBL5/EDC-DS组。图2各组VEGF释放曲线的表达Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS组和LBL5/EDC-DS组血管片对血液相容性的影响DS组血管片表面可见少量血小板黏附，血小板伸出大量颗粒状伪足。10个不同平面计数血小板为(60±12)个/cm2。LBL5/EDC-DS组表面血小板数量明显减少，血小板形态较为规则，未形成伪足，10个不同平面计数血小板为(12±5)个/cm2。见图3。如表3所示，，DS组血管片无抗凝血活性。与DS组比较，LBL5/EDC-DS组血管片各个时间点
【作者单位】： 山东大学附属省立医院心外科;山东大学附属省立医院妇科;中南大学湘雅二医院心外科;
【基金】：山东省医药卫生科技发展计划(2013WS0115)
【分类号】：R318.08;R54
本文编号：2546724
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