AVE3085对ADMA损伤的人冠状动脉内皮细胞的保护作用

发布时间：2020-03-01 21:36

【摘要】：目的研究非对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)对人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)的损伤作用,并探讨内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)增强剂AVE3085对ADMA损伤的HCAEC的保护作用。方法原代培养的HCAEC分4个组:对照组、ADMA组、ADMA+AVE3085组、ADMA+DMSO组,在含相应药物的培养基中培养24h后,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中eNOS基因的表达;应用Western-Blot方法检测细胞中eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOSser1177)蛋白的表达量;应用荧光探针检测细胞NO的释放量和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成量;应用荧光镜检和流式细胞仪计数检测细胞凋亡。结果与对照组比较,ADMA使eNOS表达显著下调(F=1041.17,q=80.50,P0.01),eNOS和p-eNOSser1177表达量也随之下降(F=391.35~432.74,q=23.55~34.62,P0.01),NO释放量降低(F=600.36,q=32.18,P0.01),ROS生成增加(F=918.05,q=38.62,P0.01),凋亡细胞的数量显著增加(F=126.98~361.55,q=13.60~24.53,P0.01)。与ADMA组相比,ADMA+AVE3085可显著恢复eNOS-m RNA的表达(F=1041.17,q=36.83,P0.01),上调eNOS和p-eNOSser1177蛋白的表达(F=391.35~432.74,q=22.35~35.41,P0.01),促进NO释放(F=600.36,q=28.17,P0.01),抑制ROS生成(F=918.05,q=34.11,P0.01),显著抑制细胞凋亡(F=126.98~361.55,q=12.65~21.91,P0.01)。结论ADMA对HCAEC具有损伤作用。AVE3085通过上调eNOS基因,eNOS和p-eNOSser1177蛋白的表达,促进细胞NO释放,抑制细胞ROS的产生和凋亡对HCAEC起到保护作用。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R541.4

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本文编号：2584153