血清miRNA-192-5p与冠心病的相关性研究

发布时间：2020-10-16 20:18

　　 目的:探讨血.清miR-192-5p表达水平与冠心病患病的关系以及分析miR-192-5p在TNF-α和缺氧诱导的内皮细胞损伤中的表达变化,为进一步明确miR-192-5p在冠心病血管内皮细胞损伤中的发病机制提供人群研究证据和研究方向。方法:1.连续收集2017年7月至2017年12月在延边大学附属医院心血管内科住院并经冠脉造影术确认的冠心病患者41例,其中男性为24例,女性为17例,平均年龄(62.98 ±7.32)岁。随机选取同期年龄和性别相匹配的健康体检人群,经询问病史、常规体检无证据提示患有冠心病的健康体检者40例,其中男性22例,女性为18例,平均年龄(61.85±6.66)岁。清晨空腹采集静脉血4ml,室温1h内迅速分离血清并置于冻存管中-80℃保存,应用实时荧光定量PCR分析血清miR-192-5p表达水平,并对PCR产物进行测序验证。记录所有研究对象资料包括冠心病危险因素、临床实验室检查结果等病史资料。分析血清miR-192-5p表达水平与冠心病患病的关系。2.细胞实验选择ATCC提供的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)。选用3-7代,铺板密度约25%的HUVEC接种到细胞培养皿中培养。在细胞密度增至70-80%时,更换为ECM基础培养基饥饿培养12h,分别转入含20ng/mL TNF-α的培养基和缺氧箱中培养12、24、36和48h。用PBS清洗收集内皮细胞,提取分离细胞RNA,应用实时荧光定量PCR分析内皮细胞中miR-192-5p的表达变化。细胞实验通过构建TNF-α和缺氧诱导的内皮细胞损伤模型,模拟人体内皮损伤的部分情况。3.应用SPSS17.0统计软件进行数据分析。计数资料采用百分比表示,样本百分率间比较用X2检验。计量资料进行正态分布以及方差齐性检验,正态分布的资料用x±s表示,组间均数比较采用独立样本t检验;非正态分布采用中位数(P25,P75)表示,组间比较采用非参数检验。相关性分析采用Spearman相关分析。logistic回归分析miR-192-5p对冠心病患病影响。ROC曲线评价miR-192-5p的诊断性能,ROC曲线下面积(AUC)作为诊断指标。以P0.05为差异有统计学意义,所用P值均为双侧检验。结果:1.临床血清学实验结果显示,冠心病组的血清miR-192-5p表达水平明显低于对照组(P0.001)。2.Spearman相关性分析显示冠心病组的血清miR-192-5p的表达水平与IL-6呈明显负相关(r-0.330,P=0.035)。3.Logistic回归分析显示在校正混杂因素影响后,血清miR-192-5p表达减低(OR=0.084,95%CI 0.013-0.534,P=0.009)与冠心病患病风险相关。4.ROC 曲线显示 miR-192-5p 曲线下面积 AUC 为 0.913(95%CI,0.846-0.979;P0.001);在ROC曲线灵敏度特异度最大处,miR-192-5p相对表达水平的cut-off值为-1.73,此时的灵敏度为80.5%,特异度为97.5%。5.TNF-α诱导内皮细胞损伤模型中,miR-192-5p受TNF-α调节呈现低表达,尤其在共培养24h时,miR-192-5p表达呈明显下调(P=0.037),其余时间点miR-192-5p表达水平无明显差异(P0.05)。6.缺氧诱导的内皮损伤模型中,miR-192-5p表达水平在缺氧处理的各个时间点无明显差异(P0.05)。结论:1.冠心病患者血清miR-192-5p表达显著降低,其降低水平与冠心病风险相关,miR-192-5p是诊断冠心病的潜在生物标志物。2.miR-192-5p在TNF-α处理的内皮细胞中表达下调,其下调水平受到TNF-α培养时间调节,提示miR-192-5p对TNF-α诱导的内皮细胞损伤产生应答反应。3.miR-192-5p在缺氧处理的内皮细胞中表达无明显差异,而且不受缺氧时间调节,提示内皮细胞中miR-192-5p表达不受缺氧调节。4.冠心病患者血清miR-192-5p与IL-6呈明显负相关性:受TNF-α调节的内皮细胞miR-192-5p与IL-6表达趋势相反,提示miR-192-5p可能参与内皮炎症反应,是治疗冠心病的潜在新靶点。
【学位单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R541.4
【部分图文】：

士学位论文?冠心病组与对照组血清ｍｉＲ－１９２－５ｐ表达水平比较??血清ｍｉＲＮＡ相对表达水平进行对数转换，ｍｉＲ－１９２－５ｐ表２?ｍｉＲＮＡ表示。结果显示，血清ｍｉＲ－１９２－５ｐ在冠心病组表于健康对照组［－３．９１５（－５．９５９，－２．１６２），０．０６８（－０．８０４，０．４１０）；尸＜）。??＜

延边大学硕士学位论文?实验结果??ＦＢＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）?０．０７７?０．６３４?－０．１６８?０．３００?－０．１４１?０．２１０??ＩＬ－６（ｎｇ／ｍＬ）?－０．３３０?０．０３５?－０．０２３?０．６８７?－０．４１１?＜０．００１??ＣＲＰ（ｍｇ／Ｌ）?０．０９８?０．５４２?－０．２１４?０．１８６?－０．３０９?０．００５??ＨＣＹ?（ｕｍｏｌ／Ｌ）?０．０７５?０．６４１?０．２９７?０．０６２?０．１?１１?０．３２２??ＣＲＥ（ｕｍｏｌ／Ｌ）?０．０３７?０．８１７?－０．１３１?０．４２２?０．０３５?０．７５４??ＵＡ（ｕｍｏｌ／Ｌ）?－０．１５４?０．３３５?－０．０９９?０．５４５?－０．１８４?０．０９９??．?５１?ｒＭＵ３０?５］?ｒ＝－０．４Ｉｌ??＝

结果显示ｍｉＲ－１９２－５ｐ的ＲＯＣ曲线下面积为０．９１３?（９５％ＣＩ??［０．８４６－０．９７９］；尸＜０．００１?），血清?ｍｉＲ－１９２－５ｐ?表达水平的?ｃｕｔ－ｏｆｆ?值为－１．７３，??此时的灵敏度为８０．５％，特异度为９７．５％，见表４和图５。???表４?ｍｉＲ－１９２－５ｐ表达对冠心病的诊断性能???参数?ＡＵＣ（９５％ＣＩ）?Ｃｕｔ－ｏｆｆ值灵敏性（％）特异性（％）?Ｐ??ｍｉＲ－１９２－５ｐ?０．９１３（０．８４６－０．９７９）?－１．７３?８０．５?９７．５?＜０．００１??ＣＲＰ?０．７１０（０．５９４－０．８２６）?１．４１?４８．８?９２．５?０．００１??ＩＬ－６?０．６８２（０．５６４－０．８００）?１２．６９?４＾８?８７．５?０．００５??１９??
【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 廖江铨;刘咏梅;王阶;;miRNA在冠心病诊断和治疗中的研究进展[J];中国科学:生命科学;2015年08期

2 蒋珽;项阳;;MicroRNA在冠心病中的作用研究[J];东南大学学报(医学版);2012年05期

本文编号：2843729