循环microRNA-423-5p可作为老年深静脉血栓形成患者的潜在诊断生物制剂
发布时间：2020-10-24 17:30
目的:本研究旨在探讨血浆miR-423-5p(microRNA-423-5p)对老年下肢骨折患者深静脉血栓形成(Deep Vein Thrombosis,DVT)的诊断和预测价值。方法:前瞻性收集2017年4-8月河北医科大学第三医院创伤急救中心老年骨科行手术治疗的老年下肢骨折患者(≥65岁)84例,20名年龄和性别匹配的健康志愿者。参与本次实验的所有患者和志愿者均签署了知情同意书。所有老年下肢骨折患者均于术前、术后行双下肢深静脉彩超检查,并根据术前、术后的超声检查结果将患者分为两组:DVT组和no-DVT组(住院期间未发生DVT)。在患者入院第1天,术前1天,术后1天和术后7天抽取患者空腹静脉血6ml。获得血浆样本后,首先通过microRNA测序方法,找出对DVT最敏感的miRNA(miR-423-5p)。然后通过酶联荧光试验法和实时PCR(RT-PCR)测定血浆中D-二聚体和miR-423-5p的水平。并通过SPSS软件分析年龄、高血压、糖尿病、创伤、手术和DVT等因素对血浆中D-二聚体和miR-423-5p的水平的影响。结果:与对照组(Con)和no-DVT组相比,DVT组住院第一天血浆miR-423-5p显着上调(P0.05),且倍数变化分别为15.47和2.37。no-DVT组患者在入院第1天和术后1天,血浆miR-423-5p表达水平会一过性的上调,但在创伤和手术打击过后,我们发现血浆miR-423-5p的表达水平呈现降低趋势。围手术期(入院第1天,术前1天,术后1天和术后7天),DVT组血浆miR-423-5p表达明显高于no-DVT组,且保持在较高水平。受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristic,ROC)分析显示血浆miR-423-5p和D-二聚体的受试者工作特征曲线下面积(Area Under Curve,AUC)分别为0.663(95%CI:0.545-0.781)和0.491(95%CI:0.364-0.617)。结论:年龄、高血压、糖尿病等因素对老年下肢骨折患者血浆miR-423-5p表达水平的影响较小。创伤和手术打击都可使老年下肢骨折患者血浆miR-423-5p表达水平一过性升高,创伤和手术打击过后血浆miR-423-5p表达水平便会降低。只有DVT患者可使血浆miR-423-5p表达水平持续保持在较高水平,在住院期间不会出现下降趋势。血浆D-二聚体对老年下肢骨折患者DVT的诊断能力较低。通过ROC曲线分析发现:血浆miR-423-5p对老年下肢骨折患者DVT的诊断价值高于血浆D-二聚体。因此我们可得出结论:血浆miR-423-5p可作为老年下肢骨折患者DVT的新型非侵入性生物标志物。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R687.3;R543.6
【部分图文】：
表 6 PCR 反应体系Table 6 PCR reaction system试剂组成 剂量uantiTectsYBR Green PCR Master Mix 12.5umiScript Universal Primer 2.5uCe_miR-39_1 miScript PrimerAssay 2.5ule-free water 5.5u表 5 的 cDNA 2ul量 25ul 充分混匀，按照 Table 3 的条件设置 PCR 反应（。10）从 mspike-In Control 的每个反应中获取 CT 值信息。（11）根据 mspike-In Control 的拷贝数和 CT 值生成一个标准曲线（如
图 2 解离曲线分析n curve analysis. Dissociation curve analysis of 2e A yields only one peak, resulting from tduct . Sample B shows a peak from the specific temperature from amplification of primer–dimers特异性和特性解离曲线CR 产物的特异性和特性，在 PCR 反应程序完利用 PCR 解离曲线进行 PCR 产物的特异性分：在温度非常缓慢地增加从低温（例如 65℃）温度，PCR 产物是双链的，因此 SYBR Green但在高温下，PCR 产物变性，导致荧光迅速连续测量荧光值与温度作图，产生一条曲线，单峰是合格样品，样品 B 解离曲线为双峰是不
在 DVT 组中，发现性别，高血压和糖尿病对血浆 miR-423-5p 水平没有统计学显着影响（图 4B，C，D），P> 0.05。在 no-DVT 组中，性别，高血压和糖尿病患者血浆 miR-423-5p 水平同样无显着差异（P> 0.05）结果如图 4E，F，G 所示。这些数据表明血浆 miR-423-5p 的表达水平受DVT 的影响较大，受性别、高血压和糖尿病等因素的影响较小。表 9 研究对象的一般临床数据Table 9 General clinical data of study subject变量 对照组（20） no-DVT 组（37） DVT 组（47） 共计（104）年龄（岁） 71.25±5.95 75.38±7.76 79.45±8.13 76.42±8.18男/女 6/14 12/25 14/33 32/72糖尿病(是/否) 7/13 9/28 7/40 23/81高血压(是/否) 12/8 15/22 15/32 42/62
【参考文献】
本文编号：2854769
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R687.3;R543.6
【部分图文】：
表 6 PCR 反应体系Table 6 PCR reaction system试剂组成 剂量uantiTectsYBR Green PCR Master Mix 12.5umiScript Universal Primer 2.5uCe_miR-39_1 miScript PrimerAssay 2.5ule-free water 5.5u表 5 的 cDNA 2ul量 25ul 充分混匀，按照 Table 3 的条件设置 PCR 反应（。10）从 mspike-In Control 的每个反应中获取 CT 值信息。（11）根据 mspike-In Control 的拷贝数和 CT 值生成一个标准曲线（如
图 2 解离曲线分析n curve analysis. Dissociation curve analysis of 2e A yields only one peak, resulting from tduct . Sample B shows a peak from the specific temperature from amplification of primer–dimers特异性和特性解离曲线CR 产物的特异性和特性，在 PCR 反应程序完利用 PCR 解离曲线进行 PCR 产物的特异性分：在温度非常缓慢地增加从低温（例如 65℃）温度，PCR 产物是双链的，因此 SYBR Green但在高温下，PCR 产物变性，导致荧光迅速连续测量荧光值与温度作图，产生一条曲线，单峰是合格样品，样品 B 解离曲线为双峰是不
在 DVT 组中，发现性别，高血压和糖尿病对血浆 miR-423-5p 水平没有统计学显着影响（图 4B，C，D），P> 0.05。在 no-DVT 组中，性别，高血压和糖尿病患者血浆 miR-423-5p 水平同样无显着差异（P> 0.05）结果如图 4E，F，G 所示。这些数据表明血浆 miR-423-5p 的表达水平受DVT 的影响较大，受性别、高血压和糖尿病等因素的影响较小。表 9 研究对象的一般临床数据Table 9 General clinical data of study subject变量 对照组（20） no-DVT 组（37） DVT 组（47） 共计（104）年龄（岁） 71.25±5.95 75.38±7.76 79.45±8.13 76.42±8.18男/女 6/14 12/25 14/33 32/72糖尿病(是/否) 7/13 9/28 7/40 23/81高血压(是/否) 12/8 15/22 15/32 42/62
【参考文献】
相关期刊论文 前5条
1 丁梦圆;何杨;阮长耿;;循环microRNA在静脉血栓栓塞诊断中的研究进展[J];中华检验医学杂志;2016年10期
2 张成欢;刘云;;骨科手术患者相关血栓形成风险评估的研究进展[J];医学研究生学报;2015年04期
3 魏礼清;李颖;胡建华;孔德勇;孔晓宇;卢忠心;;循环微小RNA-500在丙型肝炎肝硬化到肝癌病程中的表达[J];中华实验外科杂志;2014年06期
4 潘长福;汪泱;沈晓黎;娄远蕾;阮琼芳;邓志锋;;颅脑损伤后海马区notch信号分子及其相关miRNA的表达变化[J];中华实验外科杂志;2011年02期
5 曾俊杰;孙凯;吴承堂;雷尚通;王伟;;结直肠癌与毗邻癌旁组织中microRNA-221与CDKN1C/p57的差异表达[J];中华实验外科杂志;2011年01期
本文编号：2854769
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/xxg/2854769.html
最近更新
教材专著
