藁本内酯对自发性高血压大鼠的病理性中内膜增生的作用及机制研究

发布时间：2020-10-27 06:42

　　 目的:(1)本实验研究藁本内酯(Z-ligustilide,LIG)对自发性高血压大鼠胸主动脉粥样硬化形成病理性中内膜增生的作用。(2)研究藁本内酯抑制自发性高血压大鼠病理性中内膜增生的机制:1)探讨LIG对自发性高血压大鼠血压、血脂指标的作用。2)LIG对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移作用影响。3)LIG对自发性高血压大鼠胸主动脉VSMCs的c-Myc及α-SMA蛋白的表达影响。方法:(1)选取10周龄的雄性自发性高血压大鼠通过采用腹腔注射维生素D_3 60万/U后联合高脂饲料喂养3周的方法,塑造动脉粥样硬化病理性中内膜增生的模型。(2)造模成功后的自发性高血压大鼠分别腹腔注射药物浓度为0,10,20,40 mg/kg的藁本内酯2周,同时喂养普通饲料;然后观察并测量自发性高血压大鼠胸主动脉增生的中内膜。(3)通过无创动脉检测仪测量自发性高血压大鼠每周周一上午9点的尾动脉的血压,每次测量3次,取3次血压值的平均值。(4)通过采血针收集每只自发性高血压大鼠下腔静脉的血液2 ml,3000 r/min离心后取血清检测血脂与钙离子水平。(5)在超净台下提取自发性高血压大鼠胸主动脉的中层组织,通过组织贴壁法培养出大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞。(6)选用血管平滑肌细胞特定蛋白α-SMA抗体通过细胞免疫荧光法来鉴定细胞。(7)采用细胞划痕实验和transwell实验检测藁本内酯对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞迁移作用的变化。(8)通过蛋白免疫印迹法检测藁本内酯对自发性高血压大鼠体内血管平滑肌细胞c-Myc、α-SMA蛋白水平的表达。(9)实验数据采用SPSS 23.0统计软件分析,实验数据先进行正态性检验和方差齐性检验,在方差齐时用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD(L)法;方差不齐时用非参数检验,当P0.05时,差异具有统计学意义。结果:(1)造模3周后观察到自发性高血压大鼠胸主动脉中内膜粥样硬化形成并伴有有明显的中内膜增生。(2)藁本内酯在药物浓度10,20,40 mg/kg对动脉粥样硬化形成的病理性中内膜增生抑制作用与对照组比较均有显著差异(P0.001)。(3)藁本内酯在药物浓度10,20,40 mg/kg降低自发性高血压大鼠收缩压和舒张压的作用与对照组比较均有显著差异(P0.001)。(4)藁本内酯在药物浓度为40 mg/kg降低自发性高血压大鼠血胆固醇、甘油三酯的作用与对照组比较有统计学差异(P0.01)。但对低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血钙离子表达水平未见明显差异的影响(P0.05)。(5)通过在光学显微镜下对细胞的形态学观察及细胞免疫荧光检测得知培养的细胞是所需要的平滑肌细胞。(6)藁本内酯能在药物浓度10,20,40 mg/kg对自发性高血压大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的迁移抑制作用与对照组比较均有显著差异(P0.001)。(7)藁本内酯在药物浓度10,20,40 mg/kg能使自发性高血压大鼠体内的血管平滑肌细胞的α-SMA表达量上调,下降c-Myc蛋白表达量,与对照组比较均有显著差异(P0.05)。结论:藁本内酯能有效抑制自发性高血压大鼠动脉粥样硬化形成的病理性中内膜增生,我们还发现藁本内酯显著地抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞的迁移能力。我们实验还发现藁本内酯降低自发性高血压大鼠的收缩压和舒张压,对降低血清中的总胆固醇、甘油三酯水平也发挥作用。
【学位单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R544.1
【部分图文】：

图 1-1 藁本内酯结构式分子式：C12H14O2Fig. 1-1 Structure of ligustilideMolecular formula: C12H14O2药理作用表明，LIG 化学成分具有舒张血管、抗炎、41]。王力宏等[42]通过实验研究显示了藁本内的表达从而抑制肿瘤新生血管的生成，从而性脑白质损伤的研究中发现，Kuang X 等[43]的神经炎性具有显著的抑制作用，对脑白质APK/NF-kB 与 MAPK/STAT3 信号通路有关。过抑制有丝分裂原激活蛋白激酶和核因子 k影响。藁本内酯具有镇痛作用，并且研究发

实验数据采用 SPSS 23.0 统计软件分析，实验数据先进行正态性检验和方差齐性检验，在方差齐时用单因素方差分析，组间两两比较采用 LSD(L)法；方差不齐时用非参数检验，当 P< 0.05 时，差异具有统计学意义。2.3 实验结果2.3.1 自发性高血压大鼠血管中内膜动脉粥样硬化的形成（1）低倍镜下可观察到自发性高血压大鼠胸主动脉中内膜有明显的粥样硬化斑块形成，并且有不同程度的中内膜增厚。（见图 2-1 a）（2）高倍镜下可见自发性高血压大鼠胸主动脉中内膜的内皮细胞脱落，血管中层的血管平滑肌细胞排列紊乱，并大量增殖和迁移至中内膜下形成病理性中内膜增生。（见图 2-2 b）

广东药科大学硕士研究生学位论文2.3.2 4 组自发性高血压大鼠中内膜增生情况通过对 4 组自发性高血压大鼠胸主动脉的病理切片的观察，我们还通过用Imagej 软件对 4 组大鼠的胸主动脉的中内膜进行了测量，并且进行了统计分析。结果显示对照组自发性高血压大鼠的胸主动脉中内膜有明显的粥样硬化的形成并伴有明显的病理性中内膜增生，测量的中内膜的厚度为 171.51 ± 11.932 μm。然而，实验组（10，20，40 mg/kg）对比对照组自发性高血压大鼠的胸主动脉中内膜的粥样硬化斑块有明显改善，病理性中内膜增生明显受到了抑制，测量统计的中内膜的厚度分别为 127.90 ± 5.288 μm、110.24 ± 5.076 μm、93.68 ± 4.111 μm。抑制效果与药物干预的浓度呈正比关系，其中实验组 40 mg/kg 抑制中内膜增生的作用最明显。
【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 谢哲;张卫;罗少洪;李春梅;王蔚;卢群;;藁本内酯对AngⅡ诱导的A7r5细胞迁移的影响[J];广东药学院学报;2015年06期

2 王立宏;武兴斌;王利;;藁本内酯抗人肺癌A549细胞增殖作用研究[J];中国中医药信息杂志;2015年07期

3 王竹;高永翔;;动脉粥样硬化与巨噬细胞源性泡沫细胞的相关研究进展[J];细胞与分子免疫学杂志;2015年06期

4 周晓欢;杨玉春;张源明;陈玉岚;陈曦;梁平;;高血压及高脂血症与颈动脉粥样硬化的相关性分析[J];西部医学;2014年12期

5 赵迪;王泽穆;王连生;;炎症小体在动脉粥样硬化发生发展中的研究进展[J];现代生物医学进展;2014年30期

6 张翠英;章洪;戚琼华;;川芎的有效成分及药理研究进展[J];辽宁中医杂志;2014年10期

7 杨晶;袁博;颜红;张熙;彭买姣;贺菊乔;;藁本内酯镇痛作用及对非细菌性前列腺炎前列腺组织中NGF影响的研究[J];湖南中医药大学学报;2014年09期

8 冉莉;覃和平;梁筠;;高血压及高血压合并脑梗死与颈动脉粥样硬化的相关性分析[J];重庆医学;2014年14期

9 左爱华;王莉;肖红斌;;藁本内酯药理学和药代动力学研究进展[J];中国中药杂志;2012年22期

10 汪程远;杜俊蓉;钱忠明;;藁本内酯的研究进展[J];中国药学杂志;2006年12期

相关博士学位论文 前2条

1 滕军燕;缺血性心血管病风险评估模型的建立与研究[D];山东大学;2017年

2 丁雪燕;OCT4对血管平滑肌细胞增殖迁移及血管新生内膜增生的作用及机制[D];第二军医大学;2016年

本文编号：2858199