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在择期经皮冠状动脉支架术后患者中小檗碱的抗血小板作用

发布时间:2020-12-08 18:46
  第一部分目的:血小板功能检测包括血小板聚集试验及其他血小板激活及功能的评估。其中,全血流式细胞术具有样本需求量小,采用全血样本接近体内激活状态,不受血小板计数影响等优点。P-选择素作为一种特异性血小板表面标志物,介导血小板与包括单核细胞、中性粒细胞在内的白细胞聚集发挥炎症诱导作用。本研究拟从采样、激活、流式细胞术检测等方面探讨血小板表面P-选择素的检测方法,并进一步探索血小板表面P-选择素是否能成为一种较好的反应抗血小板治疗的指标。方法:使用21号直针从健康受试者外周静脉穿刺,采集2.7mL血样于枸橼酸钠抗凝剂的采血管。在前处理中采取控制变量法,采用不同的全血稀释倍数,多种激动剂种类及浓度梯度,设定不同流式细胞学检测参数比较血小板表面的P-选择素表达情况。结果:1.采血后将样本稀释10倍可减少血小板聚集;2.P-选择素表达与ADP剂量呈较好的正相关性,ADP浓度达到20μM可见P-选择素表达到达峰值。3.鞘液流速对检测结果存在影响。4.随贮存时间增加,血小板表面P-选择素的表达量明显增加。结论:在采血后应即刻前处理,进行适当的样品稀释,以ADP(终浓度20μM)激活处理,并以采用较低的... 

【文章来源】:北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】:52 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

在择期经皮冠状动脉支架术后患者中小檗碱的抗血小板作用


图2?10倍稀释的全血样本无拖带效应??

选择素,采集速度,流式细胞仪


流式细胞仪采样参数探索??表6不同流式细胞仪采集速度的P-选择素表达??编号?123ADP?终浓度?0?l〇HM?20^M?low-MFI?1.37?1.92?2.20medium-MFI?2.14?2.72?3.00论何种ADP浓度激活,相比于低流速,以中速进行流式细胞学收板表面P-选择素的MFI均有增加。在低或中流速收集的样本中,P-在ADP=20卩M基本可达最大表达量。????low-MFI?.medium-MFI??

选择素,贮存时间,样本,百分比


图4不同样本贮存时间的P-选择素表达??随贮存时间増加,血小板表面P-选择素的表达量明显増加(阳性百分比或平均??光强度)。加入ADP激动后的P-选择素表达较激动前仍有增加。同时贮存超过24??时的样本(S1-S4)中部分出现溶血现象(结果未显示)。、??析及讨论??血小板的流式细胞学检测,不同于红细胞、淋巴细胞,主要体现在以下方面。??一,血小板计数的正常值为l〇〇-35〇xl〇9/L,全血样本中血小板浓度较髙;其二,??血小板生物学活性较脆弱,从采样至上机检测过程中受各种因素影响,包括①不同??类型/浓度的血小板激动剂;②不恰当激活:止血带、穿刺损伤、剧烈振荡、离心、??涤;③时间:采样至前处理时间,前处理至流式细胞学时间;其三,血小板体积??小,门控策略除了采用FS/SS,应至少采用一种特异的血小板标记性抗体,如CD61、??

【参考文献】:
期刊论文
[1]四氢小檗碱对血小板聚集和血栓形成的抑制作用(英文)[J]. 宣波,王伟,李德兴.  Acta Pharmacologica Sinica. 1994(02)



本文编号:2905513

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